進(jìn)行PCR操作時(shí),操作人員應該嚴格遵守一些操作規程,zui大程度地降低可能出現的PCR污染或杜絕污染的出現。
劃分操作區:目前,普通PCR尚不能做到單人單管,實(shí)現wan全閉管操作,但無(wú)論是否能夠達到單人單管,均要求實(shí)驗操作在三個(gè)不同的區域內進(jìn)行,PCR的前處理和后處理要在不同的隔離區內進(jìn)行:
1、標本處理區,包括擴增摸板的制備。
2、擴增區,包括反應液的配制和PCR擴增。
3、產(chǎn)物分析區,凝膠電泳分析,產(chǎn)物拍照及重組克隆的制備。
4、各工作區要有一定的隔離,操作器材專(zhuān)用,要有一定的方向性。如:標本制備→PCR擴增→產(chǎn)物分析→產(chǎn)物處理。
切記:產(chǎn)物分析區的產(chǎn)物及器材不要拿到其他兩個(gè)工作區。