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熒光定量PCR試劑盒特點(diǎn)優(yōu)勢

熒光定量PCR試劑盒特點(diǎn)優(yōu)勢:

1、PCR反應特異性強

特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關(guān)鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。
2、 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞中檢出一個(gè)靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細 菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細 菌。
3、 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時(shí)完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
4、對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細 菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
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