PCR擴增不出與引物關(guān)聯(lián)：
當今發(fā)展出各色各樣的PCR擴增技術(shù)，各色各樣的高溫聚合酶，就是來(lái)解決PCR擴增中遇到的擴不出、擴增效率低的問(wèn)題。如巢式PCR就是擴增那些拷貝數很低的基因片段。 有些重復片段的擴增, GC含量高的片段，非要采用特殊擴增手段才能擴增出了。
引物擴增不出，主要是下列兩種情況比較常見(jiàn)：
1、 RT-PCR。 請注意，很多基因通過(guò)常規RT -PCR方法是很難擴增出來(lái)的。 RT- PCR成功的關(guān)鍵在于RT的反應的RNA質(zhì)量和目標基因在特定組織和細胞中含量。
2、從基因組中擴增。 一般情況下，基因在基因組中都是單拷貝，基因組作為模板需要嚴格控制用量?；蚪MDNA過(guò)高，會(huì )影響反應體系中的Mg和pH。