T細胞白血病細胞注意事項：
1. 取細胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。
2. 凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜（DMSO）對細胞不是*無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作 較大，因此，必須在1-2min內使凍存液*融化。如果復蘇溫度太慢，會(huì )造成細胞的損傷，二甲基亞砜（DMSO）選擇進(jìn)口產(chǎn)品。
3. 離心前須加入少量培養液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。
4. 離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養瓶中進(jìn)行培養，第2天換液。因為離心的目的是兩個(gè)，去除 DMSO，去除死細胞，這個(gè)是標準流程，但對一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉速和時(shí)間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過(guò)了活細胞會(huì )受壓過(guò)大， 死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細胞懸液中含有二甲基亞砜（DMSO），DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液 體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規的離心分裝的方法進(jìn)行復蘇，結果無(wú)有異常。
5. 細胞貼壁少的問(wèn)題：教科書(shū)中說(shuō)明凍存細胞解凍時(shí)1ml細胞液要加10ml－15m培養液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養基越少細胞越容易貼附。
6. 復蘇細胞分裝的問(wèn)題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養瓶中，分裝過(guò)多，細胞濃度過(guò)低，不利于細胞的貼壁。
7. 加培養基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題是DMSO的濃度，從如果你加培養基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì )比較大，就會(huì )影響 細胞生長(cháng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候對一般細胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是1％。所以如果你的凍存液的濃度是 10％DMSO的話(huà)那么加10ml以上的培養基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。