單克隆抗體是僅與目標蛋白某一特定表位結合的單一抗體。單克隆抗體的制備簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)就是將免 疫原注射到宿主動(dòng)物體內產(chǎn)生免 疫反應,之后把 B 細胞從脾臟中移出,單種 B 細胞與骨髓瘤細胞融合為 B 細胞雜交瘤,成為一個(gè)永生化胞株。這樣一來(lái),雜交瘤的 B 細胞就會(huì )一直產(chǎn)出只識別單一表位的單克隆抗體,通常這個(gè)胞株會(huì )有一個(gè)特定的克隆號(clone number),用來(lái)與其他胞株區分。雜交瘤接下來(lái)可以被注射到小鼠的腹腔中大量生產(chǎn),雜交瘤分泌富含抗體的一種液體,被稱(chēng)作腹水,用注射器抽取純化,就可獲得大量的單克隆抗體。
單克隆抗體更適用于:
1、檢測單一抗原
2、檢測蛋白質(zhì)家族的單一成員
3、不同實(shí)驗/批次的抗體檢測結果穩定一致
4、細胞染色背景較低-很適用于 IHC、ICC、IF 等應用
5、量化蛋白質(zhì)表達 (例:流式或熒光細胞分選)
6、探測分子結構變化
7、探測磷酸化狀態(tài)的變化
8、為 X 射線(xiàn)晶體測試探測目標
9、制作缺少特定細胞類(lèi)型的動(dòng)物模型
10、免 疫治 療
單克隆抗體不建議用于:
1、根據同源性檢測不同物種的目標蛋白;
2、檢測濃度較低的目標蛋白;
3、檢測形態(tài)變化了的蛋白。單克隆抗體是僅與目標蛋白某一特定表位結合的單一抗體。