ELISA的檢測目的是為了實(shí)驗提供準確的實(shí)驗依據,為了保證實(shí)驗數據的可靠性,在實(shí)驗過(guò)程中必須堅持quan面的質(zhì)量控制和全過(guò)程質(zhì)量控制,在收集標本前都必須有一個(gè)完整的計劃。ELISA樣本使用注意事項:
1、每個(gè)樣本量收集體積=100ulx檢測種類(lèi),如果要做復孔,標本量收集體積=100ulx檢測種類(lèi)x2。
2、樣本收集后若在一周內進(jìn)行檢測可保存于2-8°C,若不及時(shí)檢測,請進(jìn)行分裝,凍存于-20°或-80°C,避免反復凍融。
3、試劑盒的檢測范圍不等同于樣本中待測物的濃度范圍,建議實(shí)驗前通過(guò)相關(guān)文獻預估樣本中待測物的濃度并通過(guò)預實(shí)驗確定樣本。
4、血清標本采集是應注意避免溶血,紅細胞溶解是會(huì )釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),溶血標本可能會(huì )增加非特異性顯色。
5、為了保證尿液檢測的準確性,必須正確收集尿液標本和保存,收集尿液的容器必須要清潔干燥,使用一次性的容器,避免因用藥并清潔不到而造成的污染,尿液樣本必須新鮮,留取后,應及時(shí)檢測或保存。
6、標本宜在新鮮是檢測如有xi 菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會(huì )產(chǎn)生假陽(yáng)性反應。如在冰箱中保存過(guò)久,其中可能發(fā)生聚合,間接法ELISA中樂(lè )視本底加深。
7、反復凍融會(huì )使蛋白效價(jià)降低,所以待測樣本如需多次檢測,宜少量分裝凍存。