PCR檢測試劑盒實(shí)驗步驟：
1. 產(chǎn)品僅用于科研取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
2. 兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
3. RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
4. RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
5. RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
6. 溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
注意事項：
1、使用本試劑前請仔細閱讀本說(shuō)明書(shū)全文。
2 、操作時(shí)應盡量少說(shuō)話(huà)，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽(yáng)性；整個(gè)檢測過(guò)程中，反應體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應分區域進(jìn)行，以避免交叉污染。
3 、實(shí)驗時(shí)，試劑盒組分中的試劑使用前應充分融化并混勻（混勻時(shí)禁止激烈振蕩，只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻）。
4、 反應管中加好所有的試劑后，應盡快上PCR儀進(jìn)行擴增，以免形成過(guò)多的二聚體。
5、細胞培養物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會(huì )影響本品的檢測結果。如果用戶(hù)需要進(jìn)一步提高檢測。