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內源性RNA酶常用的RNA酶抑制劑有哪些?

對內源性RNA酶,目前常用的RNA酶抑制劑有:


1、RNA酶的蛋白質(zhì)抑制劑(RNasin),它是從人胎盤(pán)分離的一種蛋白質(zhì),可以與多種RNA酶緊密結合形成非共價(jià)結合的復合物,使RNA酶失活。RNA酶的蛋白質(zhì)抑制劑制品經(jīng)數次凍融后或放在氧化條件下應棄之不用。RNA酶的蛋白質(zhì)抑制劑不干擾反轉錄或mRNA在無(wú)細胞體系中的翻譯。


2、氧釩核糖核苷復合物,它是由氧釩離子和4種核糖核苷之中的任意一種所形成的復合物,是一種過(guò)渡態(tài)似物,它能與多種RNA酶結合并高效抑制RNA酶活性。然而氧釩核糖核苷復合物能強烈抑制mRNA在無(wú)細胞體系中的翻譯,因此必須用含0.1%羥基喹啉的苯酚多次抽提以除之;


3、硅藻土,硅藻土能吸附RNA酶,并且在后續的RNA純化過(guò)程中經(jīng)離心除去;


4、異硫氰酸胍,它是強力的蛋白質(zhì)變性劑,在破壞細胞結構使核酸從細胞核中解離出來(lái)的同時(shí)也使RNA酶變性失活;


5、焦碳酸二乙酯(DEPC),它是RNA酶強烈抑制劑,但其作用并不是優(yōu)良的。DEPC主要用于不能高壓滅jun的材料和器皿的RNA酶處理;


6、其它化學(xué)試劑,如SDS、尿素等對RNA 酶也有一定的抑制作用。


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