分享細胞培養五點(diǎn)小技巧:
1. 買(mǎi)細胞要去靠譜的地方買(mǎi),比如 ATCC 或者素冉生物。一般上面會(huì )有針對細胞的介紹,這樣培養之前可以了解細胞正常生長(cháng)的狀態(tài)圖、傳代、培養基的類(lèi)型等。
2. 不管是買(mǎi)的細胞,還是別人惠贈的細胞,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測是否有支原體污染;迅速擴增凍存,凍存細胞復蘇后第di二天*更換一次培養基。
3. 發(fā)現細胞有污染迅速處理掉,特別是當你養了很多種細胞時(shí)。Xi菌污染、zhen菌污染很容易發(fā)現,支原體污染的話(huà),細胞會(huì )長(cháng)的慢,可以買(mǎi)個(gè)支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。
4. 不同細胞生長(cháng)周期不同。有的生長(cháng)很快,比如說(shuō) MDA-MB-231,傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了。有的又是特別慢,比如 BT474,傳代是一分二,復蘇起始的時(shí)候兩周多才能長(cháng)滿(mǎn)。這就需要要在培養細胞的過(guò)程中多多摸索。
5.對于嬌弱的細胞,就得細心呵護。胰酶消化不能過(guò)久,吹得時(shí)候要輕柔,離心時(shí)候也要注意轉速和時(shí)間。每天都要去看一下細胞,肉眼觀(guān)察培養基狀況、顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)狀況。記住,是每天。