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ELISA樣本稀釋的原則
ELISA樣本稀釋的原則如下:
在查詢(xún)背景知識,或者通過(guò)預實(shí)驗,確認了樣本濃度過(guò)高,需要進(jìn)行稀釋?zhuān)鸵鶕韵略瓌t,嚴謹操作和計算。
1、稀釋倍數合理。稀釋后樣本測定的OD值,要求落在標準品高值OD值的半量程內,假定標準品高值的OD值是2.4,那么稀釋后的樣本,OD值接近1.2,在這個(gè)范圍附近,計算的濃度值為準確,以這個(gè)結果乘以稀釋倍數,得到的樣本濃度準確。
2、稀釋過(guò)程規范。特別是大倍比的稀釋?zhuān)瑉ui 好是梯度稀釋。比如樣本要稀釋200倍,就先稀釋10倍,再在10倍稀釋的基礎上,再進(jìn)行稀釋20倍,得到200倍。
3、樣本取樣量不要太小。在樣本充足的情況下,樣本取樣量不要低于5uL,越低的取樣量,在混勻取樣過(guò)程中,誤差越大。
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