抗原與抗體發(fā)生特異性結合后，雖由親水膠體變?yōu)槭杷z體，若溶液中無(wú)電解質(zhì)參加，仍不出現可見(jiàn)反應。為了促使沉淀物或凝集物的形成，常用0.85％氯化鈉或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液。由于氯化鈉在水溶液中解離成Na+和C1－，可分別中和膠體粒子上的電荷，使膠體粒子的電勢下降。當電勢降至臨界電勢（12～15mV）以下時(shí)，則能促使抗原抗體復合物從溶液中析出，形成可見(jiàn)的沉淀物或凝集物。下面兩大主要因素影響抗原抗體反應：
一、溫度
在一定范圍內，溫度升高可加速分子運動(dòng)，抗原與抗體碰撞機會(huì )增多，使反應加速。但若溫度高于56℃時(shí)，可導致已結合的抗原抗體再解離，甚至變性或破壞；在40℃時(shí)，結合速度慢，但結合牢固，更易于觀(guān)察。常用的抗原抗體反應溫度為37℃。每種試驗都有其*的*適反應溫度，例如冷凝集素在4左右與紅細胞結合，20℃以上反而解離。此外，適當振蕩也可促進(jìn)抗原抗體分子的接觸，加速反應。
二、酸堿度
抗原抗體反應在合適的pH環(huán)境中進(jìn)行。蛋白質(zhì)具有兩性電離性質(zhì)，因此每種蛋白質(zhì)都有固定的等電點(diǎn)?？乖贵w反應一般在pH為6～8進(jìn)行。PH過(guò)高或過(guò)低都將影響抗原與抗體的理化性質(zhì)，例如pH達到或接近抗原的等電點(diǎn)時(shí)，即使無(wú)相應抗體存在，也會(huì )引起顆粒性抗原非特異性的凝集，造成假陽(yáng)性反應。