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培養細胞實(shí)驗試劑簡(jiǎn)述

     細胞培養也叫細胞克隆技術(shù),在生物學(xué)中的正規名詞為細胞培養技術(shù)。細胞培養技術(shù)可以由一個(gè)細胞經(jīng)過(guò)大量培養成為簡(jiǎn)單的單細胞或極少分化的多細胞,這是克隆技術(shù)必須 的環(huán)節,而且細胞培養本身就是細胞的克隆。接下來(lái)來(lái)了解在培養細胞的實(shí)驗中有有幾種試劑:

(1)高糖DMEM溶液: 用新配制的三蒸水配制,高糖DMEM干粉(規格10×1L),溶入約總量的1/3的三蒸水,并用水洗凈包裝袋,在磁力攪拌器上攪拌30分鐘,加入NaHCO2 3.75克,補加水至終量。用1N HCL調整PH為7.2,0.22μm濾膜抽濾除 菌,分裝-20℃保存,使用時(shí)加10%的胎牛血清及雙抗溶液(終濃度:青霉素100U/ml,鏈霉素 100μg/ml)

(2) 胎牛血清: 使用前56℃水浴30分鐘滅活,無(wú)菌條件下分裝成10ml包裝,-20℃保存。用時(shí)以10%濃度注入培養液中。

(3) 青霉素、鏈霉素雙抗溶液 青霉素100萬(wàn)單位及硫酸鏈霉素1g無(wú)菌條件下溶于消 毒三蒸水10ml,分裝,-20℃保存。使用時(shí)每1000ml培養液加入青、鏈霉素混合液1ml,終濃度為青霉素100單位/ml,鏈霉素100μg/ml。

(4)磷酸鹽溶液(PBS): NaCl 8g, KCl 0.4g, NaHPO4.H2O 1.15g KH2PO4 0.2g 分別溶于1000ml三蒸水中,調節PH值至7.4高壓蒸氣滅 菌,分裝后4℃保存。

(5)胰蛋白酶溶液: 用三蒸水制備成0.25%濃度,0.22μm濾膜抽濾除 菌,4℃保存。

(6)0.1%明膠溶液: 稱(chēng)取明膠粉劑0.1g于燒杯中,加入三蒸水100mL于50℃充分攪拌至其*溶解,0.22μm濾膜抽濾除 菌,4℃保存。

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