分享人ELISA檢測試劑盒實(shí)驗中細節總結:
1.切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
2.合理安排檢測量，以免反應板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(cháng)。
3.在吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
4.務(wù)必做雙孔實(shí)驗，這樣才既能保證數據的準確性，又能反映出試劑盒的精密度。
5.樣品稀釋液應用加液器加注，并經(jīng)常校對其準確性。
6.為防止樣品蒸發(fā)，試驗時(shí)將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜。
7.未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。辣根過(guò)氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過(guò)的辣根過(guò)氧化物酶標記抗人IgG工作液。
8.ELISA試劑盒實(shí)驗中，加樣后及時(shí)放人孵箱，標本較多時(shí)，要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴格控制操作時(shí)間，防止孵育時(shí)間人為延長(cháng)，導致非特異性結合緊附于反應孔周?chē)?，難以清洗徹底。
9.剩余樣品及廢棄物應經(jīng)121℃高壓蒸汽滅 菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消 毒劑處理30分鐘后廢棄。
10.ELISA試劑盒洗滌時(shí)各孔均需加滿(mǎn)液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。
11.每次實(shí)驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是后加底物溶液及2N H2SO4。測量時(shí)先用此孔調OD值至零。
12.手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。應靜置15～30s，不要將一個(gè)酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中，防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。
13.對樣本的結果有疑問(wèn)時(shí)需要使用其他檢測方法進(jìn)行驗證。
14.沒(méi)有去離子水或雙蒸水時(shí)，可以使用娃哈哈純凈水配制溶液，切勿使用自來(lái)水。
15.在使用微量加樣器時(shí)，吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭，即使吸取標準品溶液。
16.吸取液體時(shí)速度不易太快，以免產(chǎn)生氣泡，人ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。
17.吸取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸，減少誤差。