生物科研抗體的制備過(guò)程:
1. 免 yi 原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免 yi 原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免 yi 原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免 yi 動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免 yi 血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免 yi 血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著(zhù)要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免 yi 血清的保存:產(chǎn)品僅用于科研抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì )影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)才 chu菌并添加防腐劑。