細胞傳代操作步驟

細胞傳代操作步驟：

細胞密度達到80-90%時(shí)即可傳代。

1、棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

2、加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

3、1-2min后，顯微鏡下觀(guān)察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

4、將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

5、用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

6、懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。