ELISA試驗溫育溫度與方式:
1、溫育的溫度:育常采用的溫度有43 、37℃、室溫或4℃等。37℃是實(shí)驗室中常用的溫育溫度,也是大多數抗原抗體結合的zui 適反應溫度??乖贵w反應一般在37℃經(jīng)1~2 h 產(chǎn)物的**可達頂峰,為加速反應,可在一定范圍內提高反應的溫度并在反應過(guò)程中連續振蕩來(lái)增加抗原抗體接觸的概率??乖贵w反應在4℃更為徹底,形成的產(chǎn)物更多、更穩定,但因所需時(shí)間太長(cháng),在ELISA檢測中一般不予采用。
2、溫育的方式:溫育方式常采用溫箱法、微波輻射法和水浴法。其中水浴法能較好解決因受熱不均衡所致的周?chē)着c中央孔結果的吸光度差異(即“邊緣效應”)??蓪LISA板置于水浴箱中,板底應貼著(zhù)水面,使溫度迅速平衡,為避免蒸發(fā),可用塑料貼封紙覆蓋板孔。若用溫箱,ELISA板應放在濕盒內,濕盒要選用傳熱性良好的材料(如金屬等),在盒底墊濕的紗布,zui 后將ELISA板放在濕紗布上。溫育過(guò)程中每塊反應板不能重疊放置,防止溫度擴散的不均勻性。