細胞實(shí)驗原理：
在不加任何條件下直接凍存細胞時(shí)，細胞內和外環(huán)境中的水都會(huì )形成冰晶，能導致細胞內發(fā)生機械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等，能引起細胞死亡。如向培養液加入保護劑，可使冰點(diǎn)降低。在緩慢的凍結條件下，能使細胞內水份在凍結前透出細胞。貯存在－130℃以下的低溫中能減少冰晶的形成。
細胞復蘇時(shí)速度要快，使之迅速通過(guò)細胞zui易受損的－5～0℃，細胞仍能生長(cháng)，活力受損不大
目前常用的保護劑為二甲亞砜（DMSO）和甘油，它們對細胞無(wú)毒性，分子量小，溶解度大，易穿透細胞。
細胞操作過(guò)程：
1. 細胞實(shí)驗室進(jìn)行常規消du，紫外照射40min以上。
2. 培養液（DMEM）、0.25％胰蛋白酶（Trypsin）恒溫水浴箱370C預熱20min，備用。
3. 二甲基亞砜（DMSO）在40C冰箱中冷藏30min，備用。
4. 從液氮保存罐中取出凍存管，立即放入400C水浴中，快速搖晃，直至凍存液完全融化。
5. 將細胞懸液移入15ml離心管，緩慢加入4ml培養液，離心（1000r/min，5min）。
6. 用培養液懸液混懸沉淀細胞，調整細胞濃度，方培養箱中培養。
7. 記錄復蘇日期。