上海西格生物科技有限公司 主營(yíng):生化試劑,標準品,對照品,PCR試劑盒,?核酸檢測試劑盒,熒光定量檢測試劑盒,生化試劑盒?,比色法試劑盒,酶活性檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免yi檢測試劑盒,試劑盒,ELISA試劑盒,抗體,重組蛋白,分光光度法檢測試劑盒,細胞株,原代細胞,細胞培養基,標準溶液產(chǎn)品。代理并銷(xiāo)售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
聯(lián)系我們
公司新聞
首頁(yè)?>?公司新聞

影響細胞轉染實(shí)驗轉染因素

影響細胞轉染實(shí)驗轉染因素 :

1、血清 

 血清影響復合物的形成,降低轉染效率

陽(yáng)離子脂質(zhì)體和 DNA 的*佳量在使用血清時(shí)會(huì )有所不同,因此想在轉染培養基中加入血清時(shí)要進(jìn)行條件優(yōu)化。大部分細胞可以在無(wú)血清培養基中幾個(gè)小時(shí)內保持健康,對于對血清缺乏比較敏感的細胞,可以使用 OPTI-MEM I 培養基。對于對血清缺乏比較敏感的貼壁細胞,建議使用 LIPOFECTAMINE 2000。


2、抗生su

比如青霉素和鏈霉素,是影響轉染的培養基添加物。這些抗生su一般對于真核細胞無(wú)毒,但陽(yáng)離子脂質(zhì)體試劑增加了細胞的通透性,使抗生su可以進(jìn)入細胞。這降低了細胞的活性,導致轉染效率低。


3、細胞代數

轉染前細胞*好經(jīng)過(guò) 1-2 次傳代保證細胞生長(cháng)旺盛容易轉染,注意貼壁細胞一旦長(cháng)滿(mǎn)就不好轉染。


4、細胞鋪板密度

一般轉染時(shí),貼壁細胞密度為 70%-90%,懸浮細胞密度為 2*10^6--4*10^6 細胞/ml 時(shí)效果較好。確保轉染時(shí)細胞沒(méi)有長(cháng)滿(mǎn)或處于靜止期。鋪板細胞數目的增加可以增加轉染活性和細胞產(chǎn)量。


5、DNA 質(zhì)量

DNA 質(zhì)量對轉染效率影響非常大。一般的轉染技術(shù)基于電荷吸引原理,如果 DNA 不純,如帶少量的鹽離子,蛋白,代謝物污染都會(huì )顯著(zhù)影響轉染復合物的有效形成和轉染的進(jìn)行。

Copyright@ 2003-2025  上海西格生物科技有限公司版權所有      電話(huà):021-57810052 傳真: 地址: 郵編:
滬ICP備2021019905號-1
欧美精品在线观看|四虎国产精品成人|91大神在线精品视频一区|99久久韩国精品二区|中文字幕亚洲欧美