操作步驟:

步驟1:配制程序凍存液,放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2:離心收集對數生長(cháng)期的細胞(貼壁細胞消化下來(lái)離心,懸浮細胞直接離心,轉速1200rpm或250g,時(shí)間3min)
步驟3:用配制好的凍存液重懸細胞,按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中,擰緊管蓋,做好標記
步驟4:凍存管放入凍存盒,凍存盒放入-80℃冰箱過(guò)夜(24h)
步驟5:凍存管從凍存盒取出,轉移至液氮長(cháng)期保存

方法二:使用無(wú)血清非程序凍存液
無(wú)血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液,無(wú)需自己配制,無(wú)需降溫盒,大大提升了便捷性。
但是,并非所有細胞都適用于這種凍存液,使用前必須做凍存測試,沒(méi)問(wèn)題后再批量應用。
細胞特性
產(chǎn)品名稱(chēng)
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SW626人卵巢癌細胞
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英文名稱(chēng)
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SW626
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分類(lèi)
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人類(lèi)細胞系
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貨號
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XG-X9453
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組織來(lái)源
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內膜腺癌組織
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形態(tài)
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上皮細胞樣
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生長(cháng)特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
生長(cháng)培養基 Leibovitz's L-15+10% FBS+1% P/S
凍存條件
凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養條件
氣相:空氣,100%
溫度:37℃
推薦傳代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
注意事項 1、該細胞推薦使用Leibovitz's L-15培養基進(jìn)行培養,Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳,會(huì )產(chǎn)生細胞毒性; 2、如您沒(méi)有無(wú)二氧化碳的培養箱,可使用DMEM替代Leibovitz's L-15,使用DMEM培養基時(shí)即可正常通入5%二氧化碳; 3、配套培養基默認Leibovitz's
L-15配置,如需DMEM配方,請聯(lián)系銷(xiāo)售下單備注更改。
背景描述 The SW 626 cell line was
initiated by A. Leibovitz in January 1974 at the Scott and White Clinic,
Temple, Texas from a surgical specimen from a cystadenocarcinoma of the ovary
in a 46 year old female Caucasian. Although originally thought to be of ovarian
origin , a recent report has suggested that the SW 626 cell line might have
been derived from an ovarian metastasis of a primary adenocarcinoma of the
colon.
年齡(性別) 女性,46歲
組織來(lái)源 內膜腺癌組織
細胞類(lèi)型 腫瘤細胞
腫瘤類(lèi)型 卵巢癌細胞
生物等級 1
致瘤性 Yes, in nude mice produces well
differentiated papillary adenocarcinomas consistent with ovarian primary.
保藏機構 ATCC; HTB-78 ECACC; 91091203
運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇,若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1)收到細胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上,可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中,若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來(lái)培養細胞,請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完全培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1:2傳代 。
一.培養基及培養凍存條件準備
1) 準備1640(推薦iCell-0002)培養基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
細胞處理

1) 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過(guò)夜。天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力,后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
魚(yú)促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)elisa檢測試劑盒
螢火蟲(chóng)熒光素酶抗體
Luciferase
10號染色體開(kāi)放閱讀框30抗體
C10orf30
絲氨酸蛋白酶14/膜型絲氨酸蛋白酶1抗體 Anti-ST14/MTSP1
抑癌基因Rbms3抗體 Anti-Rbms3
N-乙酰轉移酶8樣蛋白抗體 Anti-NAT8L
鋅指蛋白575抗體 Anti-ZNF575
OTOP2蛋白抗體
OTOP2
L-型電壓依賴(lài)型鈣通道β抗體
CACNB2
微管相關(guān)蛋白抗體 Anti-Tau protein
腺衍生血管內皮生長(cháng)因子抗體 Anti-PROK1/PRK1/EG-VEGF
蛋白酶體PSMβ3抗體 Anti-Proteasome 20S beta 3
細胞分化蛋白SEPT8抗體 Anti-Septin 8
G蛋白偶聯(lián)受體169抗體
MRGPRG
DZIP1L蛋白抗體
DZIP1L
SW626人卵巢癌細胞鋅指蛋白81抗體 Anti-ZNF81
軸索過(guò)度生長(cháng)抑制因子B受體抗體 Anti-NGBR/Nogo B receptor
RNA尿苷酸合酶結構域蛋白2抗體 Anti-RPUSD2
核突觸蛋白α+β抗體 Anti-alpha + beta Synuclein
大鼠M型肌酸激酶(CKM)elisa分析檢測試劑盒
CKM ELISA kit
人骨成型蛋白15(BMP-15/GDF-9B)elisa分析檢測試劑盒
自然殺傷細胞親環(huán)素相關(guān)蛋白抗體
NKTR
G蛋白偶聯(lián)受體139抗體
GPR139