細胞特性
|
產(chǎn)品名稱(chēng)
|
V79倉鼠肺細胞
|
英文名稱(chēng)
|
V79:V79
|
|
分類(lèi)
|
倉鼠細胞系
|
貨號
|
XG-X3742
|
|
組織來(lái)源
|
肺
|
形態(tài)
|
成纖維細胞樣
|
生長(cháng)特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
生長(cháng)培養基 RPMI-1640＋20% FBS＋1% P/S
凍存條件
凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
背景描述 V79細胞源自一只雌性中國倉鼠的肺組織，原名V細胞株；1958年Elkind將其改名為V79，并用于研究培養中的哺乳動(dòng)物細胞的X-放射線(xiàn)誘導的損傷及修復。V79細胞球蛋白產(chǎn)物和EB病毒表達為陰性；V79細胞表達Fas抗原且對TNF和抗-Fas抗體敏感。
年齡（性別） 雄
組織來(lái)源 肺
細胞類(lèi)型 自發(fā)永生化細胞
生物等級 1
倍增時(shí)間 ~16 hours
保藏機構 DSMZ; ACC-335 ECACC; 86041102
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上，可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完全培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備
1） 準備1640（推薦iCell-0002）培養基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
細胞處理
1） 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
牛血管內皮生長(cháng)因子受體3(VEGFR-3)elisa分析檢測試劑盒
大鼠血管**素樣蛋白6(ANGPTL6)elisa檢測試劑盒
細胞氧化應激活性氧（ROS）光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒
豚鼠黃體(LH)elisa分析檢測試劑盒
DNA探針聚合酶整合標記試劑盒
魚(yú)皮質(zhì)醇(Cortisol)elisa分析檢測試劑盒
大鼠絲氨酸蛋白酶抑制劑alpha-1 elisa檢測試劑盒
酵母菌SD-HIS培養基
活細胞/死細胞雙染試劑盒1000T
羥類(lèi)固醇脫氫酶17β-HSD重組兔單克隆抗體 HSD17B1
醛固酮還原酶家族1成員D1抗體 AKR1D1
G蛋白偶聯(lián)受體TGR7蛋白抗體 GPCR TGR7
HRP標記的β淀粉樣肽（1-42）單克隆抗體 beta-Amyloid(1-42), HRP conjugated
原鈣粘蛋白β7抗體 PCDHB7
粘蛋白-1單克隆抗體 MUC1
分泌細胞凋亡相關(guān)蛋白1抗體 SARP1
富含脯氨酸/絲氨酸卷曲螺旋蛋白1抗體 PSRC1
V79倉鼠肺細胞細胞分裂周期37樣蛋白1抗體 CDC37L1
細胞遷移誘導蛋白19抗體 NBR1
TOMM40L蛋白抗體 TOMM40L
WASP結合蛋白抗體 WIPF2
AF750標記的前列腺素E受體蛋白4抗體 EP4, Alexa Fluor 750 conjugated
APC標記人CD25單克隆抗體 human CD25/APC
巨噬細胞炎癥因子1β /MIP-1β抗體 CCL4
跨膜蛋白29抗體 FAM156A
純化大鼠腎上腺髓質(zhì)素（AM）基因重組表達載體（pcDNA-AM）測序引物對
人核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)elisa分析檢測試劑盒
大鼠黃體(LH)elisa檢測試劑盒
干擾素α受體2抗體
IFNAR2
精子相關(guān)蛋白AKAP抗體
AKAP associated
Sperm Protein
操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2：離心收集對數生長(cháng)期的細胞（貼壁細胞消化下來(lái)離心，懸浮細胞直接離心，轉速1200rpm或250g，時(shí)間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過(guò)夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉移至液氮長(cháng)期保存
方法二：使用無(wú)血清非程序凍存液
無(wú)血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無(wú)需自己配制，無(wú)需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒(méi)問(wèn)題后再批量應用。