操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2：離心收集對數生長(cháng)期的細胞（貼壁細胞消化下來(lái)離心，懸浮細胞直接離心，轉速1200rpm或250g，時(shí)間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過(guò)夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉移至液氮長(cháng)期保存
方法二：使用無(wú)血清非程序凍存液
無(wú)血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無(wú)需自己配制，無(wú)需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒(méi)問(wèn)題后再批量應用。
細胞特性
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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小鼠結締組織L細胞株；A9
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英文名稱(chēng)
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A9
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分類(lèi)
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小鼠細胞系
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貨號
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XG-X9791
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組織來(lái)源
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皮下結締組織；疏松結締組織和脂肪；正常
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形態(tài)
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成纖維細胞樣
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細胞別稱(chēng)：A9; A9 (Hamprecht);
A9(Hamprecht); AG 9; GM00346; GM-346; GM346
種屬來(lái)源：小鼠
年齡性別：雄；100日齡
組織來(lái)源：皮下結締組織；疏松結締組織和脂肪；正常
生長(cháng)特性：貼壁生長(cháng)
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
背景簡(jiǎn)介：A9細胞是從野生型細胞株L中分離得到的。A9細胞對HAT選擇培養基：敏感，并缺失了腺苷轉磷酸核糖基酶與次黃嘌呤轉磷酸核糖基酶；A9細胞對8-氮鳥(niǎo)嘌呤(0.003mg/ml)和6-硫代鳥(niǎo)嘌呤(0.1mM)有抗性。
生物等級：1
細胞規格：1×106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測：無(wú)
基因表達情況：
保藏機構：ATCC; CCL-1.4 ATCC; CRL-6319
BCRC; 60138
培養基：DMEM＋10%
FBS＋1% P/S
培養條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件：無(wú)血清凍存液，液氮儲存
倍增時(shí)間：
STR鑒定位點(diǎn)18-3：16；6-7：12；5-5：14,15；X-1：26,27；1-2：17,18；7-1：26,27；8-1：16；1-1：10；19-2：12；15-3：25.3；12-1：16；6-4：17,18；4-2：20.3,21.3；3-2：14；2-1：9；13-1：17.1；11-2：15,16；17-2：15；
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上，可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完全培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備
1） 準備1640（推薦iCell-0002）培養基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
細胞處理
1） 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠表睪酮(ET)elisa檢測試劑盒
組織生物化學(xué)成分定量檢測試劑專(zhuān)題
小鼠白介素23（IL－23）elisa檢測試劑盒
大鼠轉化生長(cháng)因子β1(TGF-β1)elisa檢測試劑盒
線(xiàn)粒體復合物IV蛋白共沉淀分析試劑盒
蛋白電泳預制膠4-15%，10孔 10塊/盒
植物細胞可溶性總核蛋白粗提制備試劑盒
核酸氧化8-氧脫氧鳥(niǎo)苷（8-oxo-dG）高效液相色譜（HPLC）分析試劑盒
含碳酸氫鈉，含酚紅
味覺(jué)2受體成員41抗體 T2R41
細胞骨架連接質(zhì)膜蛋白抗體 EBP50
SRC有絲分裂相關(guān)蛋白68抗體 SAM68
TRIM42蛋白抗體 TRIM42
AF680標記的上皮鈣粘附分子抗體 E cadherin, Alexa Fluor 680 conjugated
AF750標記的原纖維蛋白1抗體 Fibrillin 1, Alexa
Fluor 750 conjugated
緊密連接蛋白25抗體 CLDN25
卷曲螺旋結構域蛋白125抗體 CCDC125
小鼠結締組織L細胞株；A9原鈣粘蛋白γA12抗體 PCDHGA12
粘蛋白-2/上皮膜抗原2重組兔單克隆抗體 MUC2
分泌型磷脂酶A2抗體 Secretory phospholipase A2
富含脯氨酸蛋白15抗體 PRR15
G蛋白偶聯(lián)受體γ3抗體 G gamma3
HRP標記的堿性成纖維細胞生長(cháng)因子單克隆抗體 FGF2, HRP conjugated
凝血酶原抗體 Gamma Thrombin
丘腦分泌素受體1+2/食欲素受體1+2抗體 Orexin receptor 1+2
通用型酵母樣品細胞周期G1/S和G2/M期步（SYNCHRONY）處理試劑盒
大鼠神經(jīng)元正五聚蛋白Ⅱ(NPTX2)elisa檢測試劑盒
果蠅萃取物制備試劑盒
腦特異性跨膜蛋白抗體
NETO2
生長(cháng)分化因子1抗體
GDF1