操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2：離心收集對數生長(cháng)期的細胞（貼壁細胞消化下來(lái)離心，懸浮細胞直接離心，轉速1200rpm或250g，時(shí)間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過(guò)夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉移至液氮長(cháng)期保存
方法二：使用無(wú)血清非程序凍存液
無(wú)血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無(wú)需自己配制，無(wú)需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒(méi)問(wèn)題后再批量應用。
細胞特性
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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TM4正常小鼠睪丸Sertoli細胞
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英文名稱(chēng)
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TM4:TM4
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分類(lèi)
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小鼠細胞系
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貨號
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XG-X3698
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組織來(lái)源
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睪丸
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形態(tài)
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上皮細胞樣
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生長(cháng)特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
生長(cháng)培養基 DMEM/F12＋5% HS＋2.5% FBS＋1%
P/S
凍存條件
凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
注意事項 該細胞貼壁松散，操作時(shí)請盡量輕柔；換液時(shí)需預熱培養基；收貨如有大塊脫落的細胞團，為正?，F象，請按照收貨注意事項處理。
背景描述 TM4細胞在FSH的作用下cAMP產(chǎn)量增加，但對LH無(wú)反應；TM4細胞與原代Sertoli細胞相比，對FSH的反應性降低。據報道，TM4細胞組成性纖溶酶原激活物的產(chǎn)量很低，但可被FSH刺激產(chǎn)生，受維甲酸刺激可有大幅增高。TM4細胞可產(chǎn)生shi黃醇結合蛋白、組織纖溶酶原激活物和轉鐵蛋白；TM4細胞表達FSH受體、雄激su受體和孕激su受體；鼠痘病毒陰性。
年齡（性別） 11-13日齡
組織來(lái)源 睪丸
細胞類(lèi)型 自發(fā)永生化細胞
生物等級 1
致瘤性 No, The cells were not tumorigenic
in immunosuppressed mice, but did form colonies in semisolid medium.
基因表達情況 retinol binding protein,
tissue plasminogen activator, transferrin
保藏機構 ATCC; CRL-1715 BCRC; 60254
ECACC; 88111401
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上，可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完全培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備
1） 準備1640（推薦iCell-0002）培養基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
細胞處理
1） 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠補體蛋白4(C4)elisa分析檢測試劑盒
人趨化因子CXCL16（CXCL16）elisa檢測試劑盒
吸煙者人體肺組織微粒體組分（5毫克/毫升）
基因組提取試劑盒 50次
大鼠維生素K1(VK1)elisa檢測試劑盒
山羊骨形成蛋白2(BMP-2)elisa檢測試劑盒
植物源性食品苦杏仁（apricot kernels）基因檢測試劑盒
完全線(xiàn)粒體內膜功能/膜電位紅色熒光（TMRE）測定試劑盒
大鼠載脂蛋白A5(APOA5)elisa檢測試劑盒
內質(zhì)網(wǎng)分子伴侶SIL1抗體 SIL1
配對盒基因1抗體 PAX1
GalNAc-T6蛋白抗體 GALNT6
G蛋白結合蛋白4/慢性腎功能衰竭蛋白抗體 GTPBP4
胰高血糖素樣肽-1抗體 GLP-1 (7-36)
異質(zhì)核糖核蛋白U抗體 hnRNP U
多腺苷二磷酸多聚酶16抗體 PARP16
泛素連接酶蛋白CHFR抗體 CHFR
TM4正常小鼠睪丸Sertoli細胞褪黑相關(guān)受體抗體 GPR50/Melatonin Related Receptor
微小染色體維持缺陷蛋白結合蛋白抗體 MCM-BP
SAPCD1蛋白抗體 SAPCD1
SMARCA5抗體 SMARCA5
9號染色體開(kāi)放閱讀框93抗體 C9orf93
AF680標記的骨/軟骨蛋白多糖1抗體 Biglycan, Alexa Fluor 680 conjugated
檢查點(diǎn)蛋白HUS1B抗體 HUS1B
卷曲螺旋結構域蛋白116抗體 CCDC116
大鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)elisa檢測試劑盒
小鼠脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)elisa分析檢測試劑盒
人β淀粉樣多肽42(Aβ 42)elisa分析檢測試劑盒
IGF2基因的互補基因1蛋白抗體
IGF2AS
蛋白激酶錨定蛋白13抗體
AKAP13