操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2：離心收集對數生長(cháng)期的細胞（貼壁細胞消化下來(lái)離心，懸浮細胞直接離心，轉速1200rpm或250g，時(shí)間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過(guò)夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉移至液氮長(cháng)期保存
方法二：使用無(wú)血清非程序凍存液
無(wú)血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無(wú)需自己配制，無(wú)需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒(méi)問(wèn)題后再批量應用。
細胞特性
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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P19小鼠畸胎瘤細胞
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英文名稱(chēng)
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P19:P19
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分類(lèi)
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小鼠細胞系
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貨號
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XG-X3676
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組織來(lái)源
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胚胎；畸胎癌
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形態(tài)
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上皮細胞樣
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細胞別稱(chēng)：P-19；P19 ；小鼠畸胎瘤細胞
種屬來(lái)源：小鼠
年齡性別：雄性
組織來(lái)源：胚胎；畸胎癌
生長(cháng)特性：貼壁生長(cháng)
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
背景簡(jiǎn)介：P19細胞是加拿大渥太華大學(xué)的Mc Burney 等在1982 年從雄性C3H/He小鼠畸胎瘤中分離得到的 , 是一種能夠在體外培養的多能干細胞，P19 細胞團經(jīng)RA 誘導可分化成神經(jīng)元、膠質(zhì)細胞和纖維母細胞；而經(jīng)二甲基亞砜(DM SO ) 誘導則分化成心肌、骨骼肌和平滑肌細胞；在P19細胞向神經(jīng)元分化的過(guò)程中，神經(jīng)發(fā)育相關(guān)基因的表達模式基本模擬了正常小鼠神經(jīng)發(fā)育過(guò)程，
因此， P19 目前被用作一個(gè)研究神經(jīng)發(fā)育的體外模型。P19細胞在含有0.1mMβ-巰基乙醇的培養基：中克隆的效率高。細胞具有多能性：在500nM維生素A酸誘導下，細胞可以分化成神經(jīng)樣和神經(jīng)膠質(zhì)樣細胞；在0.5%-1.0%二甲亞砜(DMSO)存在下，細胞分化形成心臟和骨骼肌樣基質(zhì)，但不形成神經(jīng)樣或神經(jīng)膠質(zhì)樣細胞。在DMSO和維生素A酸同時(shí)存在時(shí)，細胞的分化與只有維生素A酸一樣。
生物等級：1
細胞規格：1×106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測：無(wú)
基因表達情況：
保藏機構：ATCC; CRL-1825 DSMZ; ACC-316
ECACC; 95102107
培養基：90%RPMI-1640+10% FBS
培養條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件：無(wú)血清凍存液，液氮儲存
倍增時(shí)間：~48-72小時(shí)
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上，可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完全培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備
1） 準備1640（推薦iCell-0002）培養基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
細胞處理
1） 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
乙酰輔酶A轉運蛋白1抗體 Anti-SLC33A1
ZC3H14蛋白抗體
ZC3H14
NDUFC2蛋白抗體
NADH脫氫酶3抗體
MT-ND3
FAM126B蛋白抗體
FAM126B
辣椒素受體樣蛋白1抗體 Anti-TRPV2/VRL1
核糖核酸酶6抗體 Anti-Ribonuclease 6
神經(jīng)元素3抗體 Anti-NGN3/Neurogenin 3
NDUFC2
磷酸化原基因蛋白18抗體 Anti-Phospho-Stathmin(Ser38)
神經(jīng)肽Y受體2抗體 Anti-NPY2R
環(huán)指蛋白6抗體 Anti-RNF6
腫瘤壞死因子-α抗體 Anti-TNF-alpha
大鼠泛素連接酶(E3/UBPL)elisa生化檢測試劑盒
P19小鼠畸胎瘤細胞E3/UBPL ELISA
Kit
山羊骨形成蛋白2(BMP-2)elisa生化檢測試劑盒
GoatBMP-2ELISAKit
載玻片細胞DAP KINASE蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
大鼠胰島素樣生長(cháng)因子結合蛋1（IGFBP-1）elisa檢測試劑盒
血液維生素A高效液相色譜法定量檢測試劑盒
小鼠Slit同源物1(Slit1)elisa檢測試劑盒
JNK/ SAPK抑制激酶抗體
JIK/TAOK3
羧肽酶CPO抗體
Carboxypeptidase O
大鼠白蛋白elisa檢測試劑盒
小鼠胎球蛋白A(Fetuin A)elisa生化檢測試劑盒
人Toll樣受體6(TLR6)elisa生化檢測試劑盒
組織蛋白磷酸酶2A （PP2A）活性比色法定量檢測試劑盒