操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2：離心收集對數生長(cháng)期的細胞（貼壁細胞消化下來(lái)離心，懸浮細胞直接離心，轉速1200rpm或250g，時(shí)間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過(guò)夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉移至液氮長(cháng)期保存
方法二：使用無(wú)血清非程序凍存液
無(wú)血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無(wú)需自己配制，無(wú)需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒(méi)問(wèn)題后再批量應用。
細胞特性
細胞別稱(chēng)；LLC-GFP-puro；小鼠Lewis肺癌細胞-GFP-puro；小鼠肺癌細胞株-綠色熒光蛋白標記
種屬來(lái)源；小鼠
組織來(lái)源；肺
生長(cháng)特性；半貼壁生長(cháng)
細胞形態(tài)；上皮細胞樣
細胞代數；p3-p8
背景簡(jiǎn)介；LLC-GFP細胞穩定表達螢光蛋白。該細胞株性狀穩定，培養時(shí)不需要添加維持?？捎米魑灩獾鞍谆钚詸z測中的陽(yáng)性對照，也可用于活體動(dòng)物成像實(shí)驗。該細胞通過(guò)慢病毒轉染的方式攜帶GFP基因。LLC細胞是小鼠Lewis肺癌細胞。
生物等級；1
細胞規格；1x106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測；無(wú)
保藏機構；ATCC; CRL-1642 BCRC; 60050
BCRJ; 0145 ECACC; 90020104
培養基；90% DMEM+10% FBS+PS+1.0ug/ml puro
培養條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件；無(wú)血清凍存液，液氮儲存
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上，可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完全培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備
1） 準備1640（推薦iCell-0002）培養基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
細胞處理
1） 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
羊溶菌酶(LZM)elisa分析檢測試劑盒
LZM ELISA Kit
人胞質(zhì)動(dòng)力蛋白(CD)elisa分析檢測試劑盒
CDELISAkit
石蠟切片組織CREB蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
γ干擾素(IFNG)elisa檢測試劑盒
ATP-檸檬酸裂解酶（ACL）測試盒
小鼠核轉錄因子1(AP－1)elisa檢測試劑盒
核仁蛋白5A抗體
NOL5A/NOP56
通用轉錄因子ⅡA亞基1/TFIIA-β抗體
GTF2A1 beta
胸腺細胞核蛋白1抗體 Anti-THYN1
磷酸化3磷酸肌醇依賴(lài)性蛋白激酶1 Anti-Phospho-PDK1(Ser241)
蛋白酪氨酸磷酸酶CD148抗體 Anti-PTP/PTPase/CD148
角質(zhì)蛋白β抗體 Anti-SPRR3/Cornifin B
FITC標記的鼠抗人IgG H&L單克隆抗體
LLC-LUC-GFP-PURO小鼠肺癌細胞-綠色熒光蛋白-熒光素酶標記Mouse Anti-Human IgG (3D3) mAb / FITC
FAM86A蛋白抗體
FAM86A
人CXC趨化因子受體4(CXCR4)elisa分析檢測試劑盒
HumanCXCR4ELISAKit
小鼠凝血因子Ⅶ(FⅦ)elisa分析檢測試劑盒
FⅦELISAKit
大鼠β內啡肽受體(β-EPR)elisa分析檢測試劑盒
β-EPR ELISA Kit
人黑色素elisa分析檢測試劑盒
HumanmelaninELISAkit
黑色素瘤相關(guān)抗原E1抗體
MAGEE1
16號染色體開(kāi)放閱讀框57抗體
C16orf57