操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2：離心收集對數生長(cháng)期的細胞（貼壁細胞消化下來(lái)離心，懸浮細胞直接離心，轉速1200rpm或250g，時(shí)間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過(guò)夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉移至液氮長(cháng)期保存
方法二：使用無(wú)血清非程序凍存液
無(wú)血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無(wú)需自己配制，無(wú)需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒(méi)問(wèn)題后再批量應用。
細胞特性
細胞別稱(chēng)；bEND.3; b.End3; Bend.3; bEnd3;
brain-derived Endothelial cells.3；小鼠微血管內皮細胞
種屬來(lái)源；小鼠
年齡性別；6周齡
組織來(lái)源；腦微血管
生長(cháng)特性；貼壁生長(cháng)
細胞形態(tài)；上皮細胞樣
背景簡(jiǎn)介；細胞用表達多瘤病毒中T抗原的NTKmT逆轉錄病毒轉染進(jìn)行轉化。觀(guān)察到血管性血友病因子的表達及對熒光標記的低密度脂蛋白（LDL）的攝入確認其內皮細胞特性。bEnd.3 cells細胞可用細胞因子和脂多糖(LPS)誘導細胞的Peyer＇s結高內皮細胞受體，粘膜血管定居因子(MAdCAM-1) 及內皮細胞選擇素的表達。腫瘤壞死因子 a (TNF alpha), 白介素 1 (IL-1)或 LPS的誘導作用是濃度及時(shí)間依賴(lài)的。
細胞代數；10代以?xún)?span>
背景介紹；Bend.3細胞轉染了表達多瘤病毒中T抗原的NTKmT逆轉錄病毒載體。
生物等級；1
細胞規格；1×106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測；無(wú)
保藏機構；ATCC; CRL-2299 BCRC; 60515
ECACC; 96091929
培養基；90%DMEM+10%FBS+PS
培養條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件；無(wú)血清凍存液，液氮儲存
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上，可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完全培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備
1） 準備1640（推薦iCell-0002）培養基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
細胞處理
1） 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
磷酸烯醇丙酮酸羧激酶抗體
PCK1
CBX7蛋白抗體
CBX7
磷酸化TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白抗體 Anti-phospho-TNIK(Ser769)
內脂素/前B細胞克隆增強因子-2（C端抗體） Anti-PBEF (CT)
PDZ結構域PDZK5A蛋白抗體 Anti-PDZD5A/FRMPD2L2
管內皮細胞和血管內皮細胞受體1抗體 Anti-stabilin1/STAB 1
PE-Cy7標記的兔抗馬IgG H&L
Rabbit Anti-Horse IgG
H&L / PE-Cy7
EHD4蛋白抗體
EHD4
鋅指FYVE結構域蛋白27抗體 Anti-ZFYVE27
利鈉肽受體B抗體 Anti-Natriuretic Peptide Receptor B
細胞周期檢控Rad17蛋白抗體（復制因子C） Anti-Rad17/RFC
磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體 Anti-phospho-c-Abl(Ser569)
大鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)elisa分析檢測試劑盒
bEnd.3
[BEND3]（小鼠腦微血管內皮細胞株）8-OHdG ELISA Kit
人甘露糖(Mannose)elisa分析檢測試劑盒
HumanMannoseELISAKit
大鼠心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)elisa檢測試劑盒免費代測
石蠟切片組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位直接染色試劑盒
兔膽堿乙酰轉移酶(CHAT)elisa檢測試劑盒
肉類(lèi)抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒
MCCC1蛋白抗體
MCCC1
19號染色體開(kāi)放閱讀框48抗體
C19orf48
Fas相互作用蛋白激酶3抗體
HIPK3
擬南芥ACA11抗體
ACA11