B16-F10+LUC小鼠黑色素瘤細胞熒光素酶標記

商品屬性：

商品介紹：

細胞數量：1*10^6

細胞運輸：干冰運輸（2ml凍存管）或活細胞運輸（T25瓶）

培養基： 準備DMEM(含NaHCO3 1.5g / L添加NaHCO3 1.5g/L）89 %培養基；胎牛血清10 %，P/S雙抗 1%。

培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

細胞凍存： 液氮凍存（90%血清，10%DMSO，現用現配）

細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：
如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
懸浮狀態(tài)下生長(cháng)的細胞，可以通過(guò)向培養瓶中添加完全培養基來(lái)維持細胞的生長(cháng)狀態(tài)，一般情況下細胞密度維持在1×105~1×10^6個(gè)/mL（不同細胞對密度要求不同，）可以維持細胞的正常生長(cháng)。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3） 細胞凍存: 
收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。

注意事項：

1.收到細胞后，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染。
2.收到細胞先不開(kāi)瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時(shí)（視細胞密度而定）穩定細胞狀態(tài)。接著(zhù)在倒置顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況，并對細胞進(jìn)行不同倍數拍照（建議收細胞時(shí)就整體外觀(guān)拍一張照片，觀(guān)察培養基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀(guān)察記錄細胞在運輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷(xiāo)售依據。
3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸等多方面因素影響，故本公司只保證客戶(hù)收到細胞后一周內的細胞狀態(tài)，故客戶(hù)需要售后時(shí)需出示收到細胞的時(shí)間證明及客戶(hù)提供收貨時(shí)間和發(fā)現問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過(guò)此細胞的器皿需要后方能丟棄。

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