細胞特性
細胞別稱(chēng)；HEK293-copGFP-puro;人胚腎細胞-綠色熒光蛋白標記；人胚腎細胞-copGFP-puro
種屬來(lái)源；人
組織來(lái)源；胚胎腎
生長(cháng)特性；貼壁生長(cháng)
細胞形態(tài)；上皮細胞樣
細胞代數；p3-p8
背景簡(jiǎn)介；Luciferase HEK-293細胞穩定表達螢光蛋白。該細胞株性狀穩定，培養時(shí)不需要添加維持?？捎米魑灩獾鞍谆钚詸z測中的陽(yáng)性對照，也可用于活體動(dòng)物成像實(shí)驗。該細胞通過(guò)慢病毒轉染的方式攜帶GFP基因。 HEK-293細胞是剪切過(guò)的人腺病毒5(Ad5)轉染的人胚腎細胞形成的永生化細胞，HEK-293細胞包含并表達轉染的Ad5基因。早期報道中指出，293 HEK-293細胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側端和右側端的DNA，但是現在明確了只存在其左側端的DNA。經(jīng)過(guò)對Ad5的插入點(diǎn)的克隆測序發(fā)現，Ad5的1-4344位線(xiàn)性核苷酸整合入293
[HEK-293]細胞19號染色體(19q13.2)。293 [HEK-293]細胞為人類(lèi)腺病毒載體擴的宿主，可表達異常的玻連蛋白的細胞表面受體，由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。
生物等級；2
細胞規格；1x106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測；無(wú)
保藏機構；90% DMEM+10% FBS+PS+1. 0ug/ml
puro
培養基；ATCC; CRL-1573 ATCC： PTA-4488 DSMZ： ACC-305 ECACC： 85120602
培養條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件；無(wú)血清凍存液，液氮儲存
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上，可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完全培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備
1） 準備1640（推薦iCell-0002）培養基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
細胞處理
1） 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)elisa檢測試劑盒
電壓門(mén)控鉀通道Kv4.1抗體
KCND1
嗜酸粒細胞趨化蛋白22抗體
CCL22
人丙酮醛(MGO)elisa分析檢測試劑盒
植物脊髓過(guò)氧化酶（MPO）活性比色法定量檢測試劑盒
小鼠角化細胞因子(KAF)/雙調蛋白(AR)elisa檢測試劑盒
大鼠促甲狀腺素受體(TSHR)elisa檢測試劑盒
p53激活蛋白2抗體
MYBBP1A
FAM59B蛋白抗體
FAM59B
TBR1蛋白抗體 Anti-TBR1
視黃醛脫氫酶2型抗體 Anti-RALDH2
核抑制蛋白磷酸酶1抗體 Anti-NIPP1/ARD1
蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體 Anti-SHP-2/PTPN11
人胚腎細胞+copGFP;HEK293-copGFP-puroZSWIM7蛋白抗體
ZSWIM7
神經(jīng)肽Q抗體
Neuropeptide Q
原基因18家族STMN3蛋白抗體 Anti-STMN3
核因子κB抑制蛋白β抗體 Anti-IKB beta
Rho GTP酶激活蛋白29抗體 Anti-Rho GTPase activating protein 29
腫瘤壞死因子受體相互作用蛋白抗體 Anti-TRIP
大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS)elisa分析檢測試劑盒
FAS ELISA Kit
山羊胞外超氧化物歧化酶[Cu-Zn](SOD3)elisa分析檢測試劑盒
植物脫落酸(ABA)elisa生化檢測試劑盒
ABA ELISA Kit
人促生長(cháng)釋放(GHRH)elisa生化檢測試劑盒
GHRHELISAKit
操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2：離心收集對數生長(cháng)期的細胞（貼壁細胞消化下來(lái)離心，懸浮細胞直接離心，轉速1200rpm或250g，時(shí)間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過(guò)夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉移至液氮長(cháng)期保存
方法二：使用無(wú)血清非程序凍存液
無(wú)血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無(wú)需自己配制，無(wú)需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒(méi)問(wèn)題后再批量應用。