操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2：離心收集對數生長(cháng)期的細胞（貼壁細胞消化下來(lái)離心，懸浮細胞直接離心，轉速1200rpm或250g，時(shí)間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過(guò)夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉移至液氮長(cháng)期保存
方法二：使用無(wú)血清非程序凍存液
無(wú)血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無(wú)需自己配制，無(wú)需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒(méi)問(wèn)題后再批量應用。
細胞特性
|
產(chǎn)品名稱(chēng)
|
人紅系白血病細胞；TF-1 (STR)
|
英文名稱(chēng)
|
TF-1
|
|
分類(lèi)
|
人細胞系
|
貨號
|
XG-X9291
|
|
組織來(lái)源
|
骨髓
|
形態(tài)
|
母細胞樣
|
細胞別稱(chēng)；TF1; MFD-1；TF-1；人紅白血病細胞
種屬來(lái)源；人
年齡性別；男；35歲
組織來(lái)源；骨髓
生長(cháng)特性；半貼半懸
細胞形態(tài)；母細胞樣
細胞代數；10代以?xún)?span>
背景介紹；TF-1細胞系1987年由Kitamura T等建立，源于一名35歲日本男性的肝素化骨髓抽取樣本，該患者具有嚴重的全血細胞減少癥。細胞生長(cháng)完全依賴(lài)于IL-3或GM-CSF，對IL-5無(wú)反應。多種因子和細胞因子對該細胞都有作用，如：IL-1、IL-4、IL-6、IL-9、IL-11、IL-13、CSF、LIF、NGF。該細胞不表達血型糖蛋白A和碳酸酐酶I。由該細胞的形態(tài)和細胞化學(xué)特征及珠蛋白基因的組成性表達，顯示該細胞屬于紅系。氯高鐵血紅素和δ氨基乙酰丙酸誘導細胞合成血紅蛋白，TPA刺激細胞向巨噬細胞樣細胞分化。
STR位點(diǎn)；Amelogenin：X，Y；CSF1PO：12，13；D13S317：8，9；D16S539：9，12；D18S51：13；D19S433：14，16；D21S11：30；D2S1338：19；D3S1358：15；D5S818：13；D7S820：12；D8S1179：11，15；FGA：18，19；TH01：7，9；TPOX：8；vWA：15，17；
生物等級；1
細胞規格；1x106cells/T25或1mL凍存管
支原體檢測；無(wú)
保藏機構；ATCC; CRL-2003 DSMZ; ACC-334
ECACC; 93022307
培養基；RPMI-1640+10%FBS+2ng/ml
rhGM-CSF+1%PS
培養條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件；無(wú)血清凍存液，液氮儲存
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上，可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完全培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備
1） 準備1640（推薦iCell-0002）培養基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
細胞處理
1） 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人成纖維細胞生長(cháng)因子8(FGF8)elisa檢測試劑盒
球蛋白G4(IgG4)elisa檢測試劑盒免費代測
Trypanosoma
congolense RFLP基因分析試劑盒
小鼠成纖維細胞生長(cháng)因子8(FGF8)elisa檢測試劑盒
大鼠CD45分子(CD45)elisa檢測試劑盒
大鼠肝脂酶(HL)elisa檢測試劑盒
魚(yú)果糖1,6-二磷酸酶elisa分析檢測試劑盒
人泛素蛋白(Ub)elisa檢測試劑盒免費代測
TOP10
神經(jīng)網(wǎng)蛋白CopineVI抗體 Copine-6
生長(cháng)分化因子10抗體 GDF10
NIPA樣蛋白3抗體 NIPAL3
p21激活激酶2抗體 PAK2
轉錄因子E2F6抗體 E2F6
珠蛋白抗體 Uteroglobin
含氧酸輔酶A轉移酶2A抗體 SCOT2
核糖體蛋白L23A抗體 RPL23A
人紅系白血病細胞；TF-1 (STR)鋅指蛋白223抗體 ZNF223
鋅指蛋白5抗體 ZFH5/ZFHX2
表皮生長(cháng)因子受體底物15抗體 EPS15R
叉頭蛋白O3A抗體 FOXO3A
DMXL1蛋白抗體 DMXL1
Dysferlin蛋白抗體 Dysferlin
磷酸化非受體酪氨酸蛋白激酶2抗體 Phospho-Tyk2 (Tyr1054 + Tyr1055)
磷酸化色氨酸羥化酶抗體 phospho-TPH (Ser260)
蛋白－蛋白結合分析試劑專(zhuān)題
小鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)elisa檢測試劑盒
大鼠細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)elisa檢測試劑盒
魚(yú)CD4分子(CD4)elisa生化檢測試劑盒
CD4 ELISA kit
人表睪酮elisa生化檢測試劑盒
HumanEpitestosteroneELISAKit