細胞特性
產(chǎn)品名稱(chēng)
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UWB1.289 人卵巢癌細胞
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英文名稱(chēng)
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UWB1.289
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分類(lèi)
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人細胞系
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貨號
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XG-X7437
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組織來(lái)源
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卵巢
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形態(tài)
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上皮狀
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種屬來(lái)源;人
性別年齡;女性,55歲
組織來(lái)源;卵巢
生長(cháng)特性;貼壁生長(cháng)
細胞形態(tài);上皮狀
細胞規格;1 X 106cells/T25或1 mL凍存管
培養條件;1640:MEGM +3 % FBS37 ℃, 5% CO2
凍存條件;90% FBS + 10% DMSO
傳代方法;1:3傳代,
2-3天傳1代
運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇,若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1)收到細胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上,可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中,若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來(lái)培養細胞,請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完全培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1:2傳代 。
一.培養基及培養凍存條件準備
1) 準備1640(推薦iCell-0002)培養基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
細胞處理

1) 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過(guò)夜。天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力,后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)elisa檢測試劑盒
土壤總磷/有機磷/無(wú)機磷含量測試盒
通用型亞硝酸鹽熒光定量檢測試劑盒
基質(zhì)膠體法小鼠胚胎干細胞繁殖試劑盒
大鼠抑瘤素M受體(OSMR)elisa檢測試劑盒免費代測
細胞O鏈接硫酸酯化糖胺多糖(O-sGAG)含量二甲基亞甲基藍(DMMB)比色法定量檢測試劑盒
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全細胞色素C合成酶抗體 HCCS
G蛋白偶聯(lián)受體TAS1R1蛋白抗體 GPR70
HRC蛋白抗體 HRC
原鈣粘蛋白β4抗體 PCDHB4
粘蛋白17抗體 MUC17
分泌素抗體 Secretin
富含亮氨酸重復序列跨膜結構域2抗體 LRTM2
UWB1.289 人卵巢癌細胞細胞分裂周期2樣蛋白激酶5抗體 CDC2L5
細胞內流鉀通道蛋白Kir5.1抗體 KIR5.1
TOMM22蛋白抗體 TOMM22
WAC蛋白抗體 WAC
AF750標記的帕金蛋白抗體 Parkin, Alexa Fluor 750 conjugated
APC標記人CD23單克隆抗體 human CD23/APC
巨噬細胞炎癥蛋白2( GROβ)抗體 CXCL2/GRO Beta
藍色敏感的視色素 (厚皮螺旋體) 抗體 blue-sensitive visual pigment
大鼠抗凝血酶Ⅲ抗體elisa分析檢測試劑盒
小鼠轉鐵蛋白受體2(TFR2)elisa檢測試劑盒
人促性腺釋放(GnRH)elisa分析檢測試劑盒
KLB蛋白抗體
KLB
肌動(dòng)蛋白樣蛋白6B抗體
BAF53b
操作步驟:

步驟1:配制程序凍存液,放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2:離心收集對數生長(cháng)期的細胞(貼壁細胞消化下來(lái)離心,懸浮細胞直接離心,轉速1200rpm或250g,時(shí)間3min)
步驟3:用配制好的凍存液重懸細胞,按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中,擰緊管蓋,做好標記
步驟4:凍存管放入凍存盒,凍存盒放入-80℃冰箱過(guò)夜(24h)
步驟5:凍存管從凍存盒取出,轉移至液氮長(cháng)期保存

方法二:使用無(wú)血清非程序凍存液
無(wú)血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液,無(wú)需自己配制,無(wú)需降溫盒,大大提升了便捷性。
但是,并非所有細胞都適用于這種凍存液,使用前必須做凍存測試,沒(méi)問(wèn)題后再批量應用。