操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2：離心收集對數生長(cháng)期的細胞（貼壁細胞消化下來(lái)離心，懸浮細胞直接離心，轉速1200rpm或250g，時(shí)間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過(guò)夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉移至液氮長(cháng)期保存
方法二：使用無(wú)血清非程序凍存液
無(wú)血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無(wú)需自己配制，無(wú)需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒(méi)問(wèn)題后再批量應用。
細胞特性
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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T84人結腸癌細胞
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英文名稱(chēng)
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T84
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分類(lèi)
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人細胞系
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貨號
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XG-X7438
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組織來(lái)源
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結腸
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形態(tài)
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上皮細胞樣
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種屬來(lái)源；人
組織來(lái)源；結腸
性別年齡；72歲，男性
生長(cháng)特性；貼壁生長(cháng)
細胞形態(tài)；上皮細胞樣
細胞規格；1 X 106cells/T25或1 mL凍存管
培養條件；DMEM:F12 +5% fetal bovine
serum37 ℃, 5% CO2
凍存條件；90% FBS + 10% DMSO
傳代方法；1:3傳代,
2-3天傳1代
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上，可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完全培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備
1） 準備1640（推薦iCell-0002）培養基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
細胞處理
1） 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
組織蛋白磷酸酶2A （PP2A）活性酶連續循環(huán)比色法定量檢測試劑盒
大鼠αACTIN基因甲基化檢測試劑盒
綿羊花生四烯酸(AA)elisa分析檢測試劑盒
維生素E測試盒
小鼠己糖激酶(HK)elisa檢測試劑盒
突觸結合蛋白4抗體 Anti-Synaptotagmin-4
環(huán)指蛋白190抗體 Anti-RNF190
痛覺(jué)調節肽NPFF抗體 Anti-NPFF/FMRFamide
P53應答基因蛋白5抗體 Anti-WFDC5
膜相關(guān)環(huán)指蛋白7抗體 7-Mar
腦特定蛋白Brn3B抗體 BRN3B
FITC標記人CD279 (PD-1)單克隆抗體 human CD279
(PD-1)/FITC
FLJ39378蛋白抗體 FLJ39378
血小板p47蛋白抗體 p47/Pleckstrin
液泡蛋白分選蛋白33B抗體 VPS33B
低密度脂蛋白受體結構域蛋白2抗體 LDLRAD2
端粒調控因子抗體 Tankyrase
T84人結腸癌細胞糖皮質(zhì)調節元件結合蛋白2抗體 GMEB2
頭發(fā)角蛋白32抗體 KRT32
RAS癌基因相關(guān)蛋白RAB7重組兔單克隆抗體 RAB7A
RNA聚合酶II相關(guān)因子PAF1抗體 PAF1
40S核糖體蛋白S9抗體 RPS9
7號染色體開(kāi)放閱讀框63抗體 C7orf63
激肽釋放酶4抗體 KLK4
堿性富含脯氨酸的淚蛋白抗體 PROL1
小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)elisa檢測試劑盒免費代測
通用型半胱（cysteine）含量比色法定量檢測試劑盒
動(dòng)物細胞周期G1期步（SYNCHRONY）處理試劑盒
艾滋病病毒p24抗體
HIV1 p24
α2巨球蛋白樣蛋白1抗體
α2ML1
A2ML1