細胞特性
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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SW480人結腸腺癌細胞
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英文名稱(chēng)
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SW480:SW480
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分類(lèi)
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人細胞系
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貨號
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XG-X3564
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組織來(lái)源
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結直腸癌
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形態(tài)
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上皮細胞樣
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細胞別稱(chēng)：SW-480; SW 480; SW480E
種屬來(lái)源：人
年齡性別：男 50歲
組織來(lái)源：結直腸癌
生長(cháng)特性：貼壁生長(cháng)
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
背景簡(jiǎn)介：該細胞來(lái)源于一個(gè)50歲的男性結腸癌患者，SW480 [SW-480]細胞源自原位直腸腺癌，和SW620細胞源自同一病人一年后的結轉移。CSAp和直腸抗體3陰性；角蛋白過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性。p53基因第273位密碼子的G→A突變引起Arg→His替代，309位密碼子的C→T突變導致Pro→Ser替代。細胞p53蛋白表達水平提高，癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達呈陽(yáng)性，癌基因N-myc的表達未做檢測。SW480 [SW-480]細胞不表達細胞溶解酶，一種與腫瘤入侵相關(guān)的金屬蛋白酶。有報道稱(chēng)，SW480 [SW-480]細胞表達GM-CSF。SW480 [SW-480]細胞ras原癌基因的12位密碼子有一個(gè)突變，可以用作PCR法檢測該突變的陽(yáng)性對照。1978年11月，A·Leibovitz將其提交給ATCC時(shí)已傳代至第91代。
生物等級：1
細胞規格：1×106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測：無(wú)
基因表達情況：carcinoembryonic antigen
(CEA) 0.7 ng/10^6 cells/10 days; keratin; transforming growth factor beta,
myc+; myb+ ; ras+; fos+; sis+; p53+; abl -; ros -; src -, HLA A2, B8, B17;
Blood Type A; Rh+, The cells are positive for keratin by immunoperoxidase
staining., The line is positive for expression of c-myc, K-ras, H-ras, N-ras,
myb, sis and fos oncogenes.
保藏機構：ATCC; CCL-228 DSMZ; ACC-313
ECACC; 87092801；中國典型培養物保藏中心細胞庫
培養基：90%L15+10% FBS+PS
培養條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件：無(wú)血清凍存液，液氮儲存
倍增時(shí)間：~30-50 hours
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上，可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完全培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備
1） 準備1640（推薦iCell-0002）培養基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
細胞處理
1） 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
線(xiàn)粒體蘋(píng)果酸脫氫酶（MDHm）測試盒
脂質(zhì)運載蛋白相互作用膜受體蛋白抗體
LMBR1L
組織蛋白酶q抗體
Ctsq
精子卵子結合**堿性螺旋蛋白2抗體 Anti-SOHLH2
磷酸化復制因子A蛋白2抗體 Anti-phospho-RPA32/RPA2(Thr21)
磷酸化IKB α抗體 Anti-Phospho-NFKBIA (Tyr42)
鋅指蛋白ZIC5抗體 Anti-ZIC5
E3連接酶MMS21蛋白抗體
NSE2/MMS21
甲型流感病毒血凝素2抗體
H1N1 Hemagglutinin 2
環(huán)指蛋白92抗體 Anti-TRIM11/RNF92
前列腺干細胞抗原抗體 Anti-PSCA
蛋白酪氨酸磷酸酶非受體型4抗體 Anti-PTPN4/MEG1
絲氨酸蛋白酶抑制劑B11抗體 Anti-SERPINB11
SW480人結腸腺癌細胞磷酸化DDX58抗體
phospho-DDX58 (Ser8)
嗅覺(jué)受體5H2抗體
OR5H2
細胞核轉錄因子X盒結合蛋白抗體 Anti-XBP-1
神經(jīng)*******調控蛋白1抗體 Anti-NPDC1
DNA修復蛋白Rad50抗體 Anti-RAD50
溶質(zhì)載體蛋白家族35成員C2抗體 Anti-SLC35C2
大鼠α1微球蛋白(α1-MG)elisa分析檢測試劑盒
α1-MG ELISA Kit
人過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)elisa分析檢測試劑盒
NAGPA蛋白抗體
NAGPA
FLJ39060蛋白抗體
FLJ39060
操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2：離心收集對數生長(cháng)期的細胞（貼壁細胞消化下來(lái)離心，懸浮細胞直接離心，轉速1200rpm或250g，時(shí)間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過(guò)夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉移至液氮長(cháng)期保存
方法二：使用無(wú)血清非程序凍存液
無(wú)血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無(wú)需自己配制，無(wú)需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒(méi)問(wèn)題后再批量應用。