細胞特性
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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NCI-H82人小細胞肺癌細胞
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英文名稱(chēng)
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NCI-H82:NCIH82
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分類(lèi)
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人細胞系
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貨號
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XG-X3481
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組織來(lái)源
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肺
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形態(tài)
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上皮樣，懸浮成團
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生長(cháng)特性 懸浮細胞
細胞形態(tài) 上皮樣，懸浮成團
凍存條件
凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養方案A（默認）
生長(cháng)培養基:
RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
培養條件:
氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃
推薦傳代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2-3次/周
參考資料(來(lái)源文獻)
背景描述 原始腫瘤的形態(tài)學(xué)不符合小細胞肺癌（SCLC）的特征。該細胞系在生化和形態(tài)學(xué)上是SCLC的變種，表達神經(jīng)元特異性烯醇酶和肌酸激酶的腦同工酶。它的L-DOPA脫羧酶或蛙皮素的表達量未達到可檢測水平。該細胞產(chǎn)生一個(gè)異常大小的p53 mRNA（3.7 kb）。該細胞的C-myc DNA序列擴增約25倍，c-myc
RNA比正常細胞增加24倍。據報道該細胞表達功能性ANP受體，但用ANP處理不會(huì )改變其生長(cháng)方式。該細胞的神經(jīng)絲和波形蛋白染色呈陽(yáng)性，表達v-fes，v-fms，Ha-ras，Ki-ras，N-ras和c-raf 1 mRNA。
年齡（性別） 男性；41歲
組織來(lái)源 肺
細胞類(lèi)型 腫瘤細胞
腫瘤類(lèi)型 肺癌細胞
生物等級 BSL-1
倍增時(shí)間 24 hours (PubMed=25984343);
~25 hours (CLS); ~30 hours (DSMZ).
致瘤性 Yes; Yes, in nude mice
保藏機構 ATCC; HTB-175 CLS; 300442
DSMZ; ACC-556 KCLB; 30175 NCI-DTP; NCI-H82
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上，可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完全培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備
1） 準備1640（推薦iCell-0002）培養基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
細胞處理
1） 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
突觸相關(guān)蛋白97抗體 Anti-SAP97
PE-Cy3標記的兔抗狗IgG H&L
Rabbit Anti-Dog IgG
H&L / PE-Cy3
磷酸化自噬相關(guān)蛋白9A抗體
原鈣粘蛋白γA4抗體
PCDHGA4
艾滋病病毒EP2抗體
HIVEP2
磷酸化酪氨酸激酶A抗體 Anti-Phospho-TrkA (Tyr674/675)/TrkB
(Tyr706/707)
P2Y1受體抗體/嘌呤受體抗體 Anti-P2Y1R/P2ry1
苯乙醇胺甲基轉移酶抗體 Anti-PNMT
phospho-ATG9A
(Ser735)
乳腺癌相關(guān)基因2抗體（鋅指蛋白364） Anti-ZNF364/BCA2/RNF115
螺旋環(huán)螺旋蛋白2抗體 Anti-NHLH2
染色體濃縮調控蛋白1抗體 Anti-RCC1
線(xiàn)粒體二羧酸載體蛋白抗體 Anti-SLC25A10
大鼠BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)elisa生化檢測試劑盒
NCI-H82人小細胞肺癌細胞Bid ELISA Kit
人肝素輔因子II-凝血酶(HCII-T)復合物elisa生化檢測試劑盒
HumanheparincofactorII-thrombin(HCII-T)complexELISAkit
大鼠抗/血管加壓素/精氨酸加壓素(ADH/VP/AVP)elisa檢測試劑盒
魚(yú)類(lèi)白介素1α(IL-1α)elisa檢測試劑盒
人非小細胞肺癌相關(guān)抗原211(CA211)elisa生化檢測試劑盒
大量/酵母細胞基因組DNA純化試劑盒
胞外基質(zhì)蛋白3抗體
Matrilin 3
無(wú)胸腺癥關(guān)鍵蛋白6樣抗體（迪格奧爾格綜合征）
DGCR6L
分泌素抗體 Anti-Secretin
視黃醇脫氫酶13抗體 Anti-RDH13
軸突蛋白1β/Neurexin
1β抗體 Anti-Neurexin 1 beta
包含氧化還原酶的WW域抗體 Anti-WWOX
操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2：離心收集對數生長(cháng)期的細胞（貼壁細胞消化下來(lái)離心，懸浮細胞直接離心，轉速1200rpm或250g，時(shí)間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過(guò)夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉移至液氮長(cháng)期保存
方法二：使用無(wú)血清非程序凍存液
無(wú)血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無(wú)需自己配制，無(wú)需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒(méi)問(wèn)題后再批量應用。