操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2：離心收集對數生長(cháng)期的細胞（貼壁細胞消化下來(lái)離心，懸浮細胞直接離心，轉速1200rpm或250g，時(shí)間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過(guò)夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉移至液氮長(cháng)期保存
方法二：使用無(wú)血清非程序凍存液
無(wú)血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無(wú)需自己配制，無(wú)需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒(méi)問(wèn)題后再批量應用。
細胞特性
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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MDA-MB-468人乳腺癌細胞
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英文名稱(chēng)
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MDA-MB-468:MDAMB468
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分類(lèi)
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人細胞系
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貨號
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XG-X3430
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組織來(lái)源
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乳腺；；腺癌
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形態(tài)
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上皮細胞樣
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生長(cháng)特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
生長(cháng)培養基 Leibovitz's L-15＋10% FBS＋1% P/S
凍存條件
凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養條件
氣相：空氣，100%
溫度：37℃
推薦傳代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
注意事項 1、該細胞推薦使用Leibovitz's L-15培養基進(jìn)行培養，Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳，會(huì )產(chǎn)生細胞毒性； 2、如您沒(méi)有無(wú)二氧化碳的培養箱，可使用DMEM替代Leibovitz's L-15，使用DMEM培養基時(shí)即可正常通入5%二氧化碳； 3、配套培養基默認Leibovitz's
L-15配置，如需DMEM配方，請聯(lián)系銷(xiāo)售下單備注更改。 4、該細胞培養過(guò)程中會(huì )分泌少量黑色顆粒物，不影響細胞生長(cháng)，屬正?，F象。
背景描述 MDA-MB-468細胞是由Cailleau·R等人于1977年從一位患有轉移性乳腺癌的51歲黑人女性的胸腔積液中分離得到的。雖然供體組織的G6PD等位基因雜合，但MDA-MB-468細胞始終表現為G6PD A表型。p53MDA-MB-468細胞是由Cailleau·R等人于1977年從一位患有轉移性乳腺癌的51歲黑人女性的胸腔積液中分離得到的。雖然供體組織的G6PD等位基因雜合，但MDA-MB-468細胞始終表現為G6PD A表型。p53基因273位密碼子存在G→A突變，從而導致Arg→His替代。每個(gè)MDA-MB-468細胞上存在1×10^6個(gè)EGF受體。
年齡（性別） 女性，51歲
組織來(lái)源 乳腺；；腺癌
細胞類(lèi)型 腫瘤細胞
腫瘤類(lèi)型 乳腺癌細胞
生物等級 1
倍增時(shí)間 ~36-62小時(shí)
致瘤性 Yes, in nude mice inoculated
subcutaneously with 1×10^7 cells.(Tumors developed
within 21 days at 100% frequency (5/5).)
受體表達情況 epidermal growth factor
(EGF); transforming growth factor alpha (TGF alpha)
抗原表達情況 Blood Type AB; HLA Aw23,
Aw30, B27, Bw35, Cw2, Cw4 (patient)
保藏機構 ATCC; HTB-132 DSMZ; ACC-738
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上，可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完全培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備
1） 準備1640（推薦iCell-0002）培養基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
細胞處理
1） 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）測試盒
蛋白激酶N2抗體
PKN2
巨噬細胞炎性蛋白16抗體
NF-kappa-B抑制子beta抗體
IkB beta
α1微球蛋白抗體
Alpha 1 microglobulin
小鼠硬骨素(SOST)elisa檢測試劑盒
大鼠球蛋白A(IgA)elisa檢測試劑盒免費代測
3-OMD高效液相色譜電化學(xué)定量檢測試劑盒
CCL16/LEC
辣椒素受體5抗體 Anti-TRPV5
細胞色素b245輕鏈抗體 Anti-p22-phox/Cytochrome
b245 Light Chain
卷曲螺旋結構域蛋白139抗體 Anti-PUS10/CCDC139
磷酸化酪氨酸蛋白激酶Fyn/同步原基因抗體 Anti-phospho-SLK/FYN
(Tyr530)
辣根過(guò)氧化物酶標記的羊抗豚鼠IgG H&L
MDA-MB-468人乳腺癌細胞Goat
Anti-Guinea Pig IgG H&L / HRP
泛素特異性蛋白酶50抗體
USP50
犬白介素4(IL-4)elisa生化檢測試劑盒
IL-4 ELISA Kit
小鼠肌酸激酶同工酶MM(CK-MM)elisa生化檢測試劑盒
CK-MMELISAKit
猴子α1微球蛋白(α1-MG)elisa生化檢測試劑盒
α1-MG ELISA Kit
人肺炎衣原體(Cpn)抗體(IgG)elisa生化檢測試劑盒
HumanChlamydiapneumoniae(Cpn)antibody(IgG)ELISAKit
小鼠Wnt-10b蛋白(WNT10B)elisa生化檢測試劑盒
蛋白雜交封閉溶液
/酵母菌ATP生物發(fā)光法定量檢測試劑盒
F-12營(yíng)養培養基 500ml