細胞特性
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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MDA-MB-435S人黑素瘤細胞
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英文名稱(chēng)
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MDA-MB-435S:MDAMB435S
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分類(lèi)
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人細胞系
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貨號
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XG-X3427
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組織來(lái)源
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乳腺；；導管；導管癌；胸腺滲出液
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形態(tài)
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紡錘形細胞樣
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細胞別稱(chēng)：MDA-MB-435s; MDA-MB-435 S;
MDA-MB-435-S; MDAMB435S; BrCL15
種屬來(lái)源：人
年齡性別：女；31歲
組織來(lái)源：乳腺；；導管；導管癌；胸腺滲出液
生長(cháng)特性：貼壁生長(cháng)
細胞形態(tài)：紡錘形細胞樣
背景簡(jiǎn)介：MDA-MB-435S細胞是一種紡錘形的細胞，1976年由其親本MDA-MB-435細胞中篩選得到。MDA-MB-435細胞是從31歲的轉移性乳腺導管腺癌女性患者胸水中分離得到。當用熒光染料對微管蛋白進(jìn)行染色時(shí)，親本細胞顯現散布特征(Ⅱ型)。近通過(guò)cDNA陣列研究表明，親本(MDA-MB-435細胞)可歸入黑素瘤起源。但近來(lái)證明MDA-MB-435細胞被M14黑色素瘤細胞污染。
生物等級：1
細胞規格：1×106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測：無(wú)
基因表達情況：tubulin; actin
保藏機構：ATCC; HTB-129；中國醫學(xué)科學(xué)院基礎醫學(xué)研究所細胞資源中心
培養基：90%DMEM+10%FBS
培養條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件：無(wú)血清凍存液，液氮儲存
倍增時(shí)間：
STR鑒定位點(diǎn)Amelogenin：X；CSF1PO：11；D13S317：12；D16S539：13；D18S51：13，17；D19S433：14；D21S11：30；D2S1338：19，24；D3S1358：14，20；D5S818：11，12；D7S820：8，10；D8S1179：13；FGA：21；TH01：6，7；TPOX：8，11；vWA：16，18
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上，可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完全培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備
1） 準備1640（推薦iCell-0002）培養基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
細胞處理
1） 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
組蛋白西方雜交分析試劑盒
原鈣粘附蛋白11Y/11X抗體
PCDH11Y + PCDH11X
環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗體
組織相容性抗原DRB4抗體
HLA-DRB4
α/β水解酶4抗體
ABHD4
大鼠血小板衍生生長(cháng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)elisa檢測試劑盒
冰凍切片組織CASPASE-1蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
小鼠E鈣粘著(zhù)蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)elisa檢測試劑盒免費代測
CAP2
磷酸化NF-κB活化激酶抗體 Anti-Phospho-TBK1/NAK
(Ser172)
p21激活激酶2抗體 Anti-PAK2
磷酸化血小板源性生長(cháng)因子受體α Anti-Phospho-PDGFRA(Tyr762)
溶質(zhì)載體家族蛋白21成員1C1抗體 Anti-SLCO1C1/OATP-F
PE-Cy7標記的小鼠抗羊IgG H&L
MDA-MB-435S人黑素瘤細胞Mouse
Anti-Goat IgG H&L / PE-Cy7
微管卷曲蛋白SYNC抗體
SYNC
人5羥色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)抗體(IgG)elisa生化檢測試劑盒
Human5HTIgGELISAKit
小鼠抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)elisa生化檢測試劑盒
ACA-IgMELISAKit
大鼠CDP-甘油二酯--甘油-3-磷酸3磷脂酰轉移酶,線(xiàn)粒體(PGS1)elisa生化檢測試劑盒
Rat PGS1 ELISA kit
人高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)elisa生化檢測試劑盒
HDL-CELISAKit
大鼠CC趨化因子受體9(CCR9)elisa生化檢測試劑盒
小鼠花生四烯酸(AA)elisa檢測試劑盒免費代測
天門(mén)冬氨酸氨基轉移酶(AST)elisa檢測試劑盒
石蠟切片中性脂質(zhì)油紅O間接染色試劑盒
操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2：離心收集對數生長(cháng)期的細胞（貼壁細胞消化下來(lái)離心，懸浮細胞直接離心，轉速1200rpm或250g，時(shí)間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過(guò)夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉移至液氮長(cháng)期保存
方法二：使用無(wú)血清非程序凍存液
無(wú)血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無(wú)需自己配制，無(wú)需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒(méi)問(wèn)題后再批量應用。