細胞特性
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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LS174T人結直腸腺癌細胞
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英文名稱(chēng)
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LS174T:LS174T
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分類(lèi)
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人細胞系
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貨號
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XG-X3410
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組織來(lái)源
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直腸；結直腸腺癌
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形態(tài)
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上皮細胞樣
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生長(cháng)特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
凍存條件
凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養方案A（默認）
生長(cháng)培養基:
MEM（ATCC改良）＋10% FBS＋1% P/S
培養條件:
氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃
推薦傳代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2-3次/周
參考資料(來(lái)源文獻)
背景描述 LS 174T細胞是LS 180細胞的胰dan白酶化變種。LS
174T細胞比親本更易傳代，像LS 180細胞一樣**大量的癌胚抗原(CEA)。電鏡研究表明，LS 174T細胞有豐富的微絲和細胞質(zhì)粘液素液泡。LS 174T細胞直腸抗原3陽(yáng)性；p53抗原表達陰性，但mRNA表達陽(yáng)性。LS 174T細胞角蛋白染色陽(yáng)性；LS 174T細胞癌基因c-myc、N-myc、H-ras、N-ras、Myb和fos的表達呈陽(yáng)性；癌基因k-ras和sis的表達未做檢測。
年齡（性別） 女性；58歲
組織來(lái)源 直腸；結直腸腺癌
細胞類(lèi)型 腫瘤細胞
腫瘤類(lèi)型 腸癌細胞
生物等級 BSL-1
倍增時(shí)間 ~30-40 hours
致瘤性 Yes, in nude mice (Tumors
developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated
subcutaneously with 1×10^7 cells).
抗原表達情況 serologically defined colon
cancer antigen 3; Homo sapiens, expressedHLA A2, B13, B50; Blood Type O
基因表達情況 carcinoembryonic antigen
(CEA), interleukin 10 (IL-10), interleukin 6 (IL-6), mucin The production of
CEA in the ATCC seed stock was 1944 ng per 10^6 cells in 10 days.
保藏機構 ATCC; CL-188 ATCC;
CCL-188BCRC; 60053 DSMZ; ACC-759 ECACC; 87060401
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上，可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完全培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備
1） 準備1640（推薦iCell-0002）培養基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
細胞處理
1） 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
連接蛋白JPH3抗體 Junctophilin 3
磷酸化eIF2B蛋白抗體 phospho-eIF2B epsilon (Ser539)
ARM重復X連鎖蛋白ARMCX3抗體 ARMCX3
Bcl-xL蛋白重組兔單克隆抗體 Bcl-XL
細胞色素P450 3A5抗體 Cytochrome P450 3A5
細胞周期調控蛋白D1抗體 MSF/Cell division control protein septin D1
ZDHHC14蛋白抗體 ZDHHC14
β葡萄糖苷酶2抗體 GBA2
壬基酚抗體 Nonylphenol
溶質(zhì)載體轉運蛋白家族26成員9抗體 SLC26A9
KIAA0859蛋白抗體 KIAA0859
LRRC23蛋白抗體 LRRC23
脂肪酸酰胺水解酶2抗體 FAAH2
腫瘤壞死因子α誘導蛋白1抗體 TNFAIP1
肝癌相關(guān)抗原hca25a HCA25a
骨涎蛋白抗體 Bone sialoprotein
PCR反應試劑專(zhuān)題
LS174T人結直腸腺癌細胞小鼠α羥基丁酸脫氫酶(αHBDH)elisa分析檢測試劑盒
大鼠原卟啉原氧化酶(PPOX)elisa檢測試劑盒
冰凍切片組織INSULIN R-ALPHA 蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
小鼠皮質(zhì)醇結合球蛋白(CBG)elisa檢測試劑盒
大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)elisa檢測試劑盒
細胞肌酸激酶工酶腦型（CK--BB）活性酶連續循環(huán)比色法定量檢測試劑盒
人肝細胞核因子1β(HNF-1B)elisa分析檢測試劑盒
綿羊Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)elisa分析檢測試劑盒
血液丙二醛（MDA）比色法定量檢測試劑盒
小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)elisa檢測試劑盒
大鼠白介素1α（IL－1α）elisa檢測試劑盒
角蛋白相關(guān)蛋白15.1抗體
KAP15.1
趨化因子結合蛋白2抗體
CCBP2
操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2：離心收集對數生長(cháng)期的細胞（貼壁細胞消化下來(lái)離心，懸浮細胞直接離心，轉速1200rpm或250g，時(shí)間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過(guò)夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉移至液氮長(cháng)期保存
方法二：使用無(wú)血清非程序凍存液
無(wú)血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無(wú)需自己配制，無(wú)需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒(méi)問(wèn)題后再批量應用。