細胞特性
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英文名稱(chēng)
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A431(A-431):A431A431
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貨號
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XG-X3228
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分類(lèi)
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人細胞系
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種屬
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人
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生長(cháng)特性
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貼壁生長(cháng)
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細胞形態(tài)
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上皮細胞樣
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組織來(lái)源
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皮膚
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用途
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僅供科研研究實(shí)驗
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細胞別稱(chēng)：A431; A431/P；人表皮癌細胞
種屬來(lái)源：人
年齡性別：女性，85歲
組織來(lái)源：皮膚
生長(cháng)特性：貼壁生長(cháng)
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
背景簡(jiǎn)介：皮膚癌細胞株A-431源自一位85歲女性，是D.J.Giard等人建立的一系列細胞株中的一株。它在抗胸腺細胞球蛋白、血清處理的NIH 瑞士小鼠中形成類(lèi)似于惡性黑素瘤的快速增長(cháng)的皮下腫瘤，在普通成纖維細胞和瓊脂上形成克隆。這是一個(gè)超三倍體人細胞株。
生物等級：1
細胞規格：1×106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測：無(wú)
基因表達情況：
保藏機構：ATCC; CRL-1555 ATCC; CRL-7907BCRC;
60161 BCRJ; 0032 DSMZ; ACC-91 ECACC; 85090402
培養基：90%DMEM+10% FBS+PS
培養條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件：無(wú)血清凍存液，液氮儲存
倍增時(shí)間：~80-100小時(shí)
STR鑒定位點(diǎn)Amelogenin：X；CSF1PO：11，12；D13S317：9，13；D16S539：12，14；D18S51：13，17；D19S433：15，15.2；D21S11：28；D2S1338：17，20；D3S1358：14，20；D5S818：12，13；D7S820：10；D8S1179：13；FGA：20；TH01：9；TPOX：11；vWA：15，17；
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發(fā)現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細胞狀態(tài)的依據。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過(guò)程中會(huì )因振動(dòng)脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的完全培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長(cháng)密度達70%-80%以上，可以對細胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運輸振動(dòng)脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來(lái)培養細胞，請換用按照說(shuō)明書(shū)細胞培養條件新配制的完全培養基來(lái)培養細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。
一．培養基及培養凍存條件準備
1） 準備1640（推薦iCell-0002）培養基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
細胞處理
1） 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
自然殺傷細胞親環(huán)素相關(guān)蛋白抗體
NKTR
G蛋白偶聯(lián)受體139抗體
GPR139
TEX261蛋白抗體 Anti-TEX261
突觸后密度蛋白93抗體 Anti-PSD93
B細胞白血病前體蛋白轉錄因子1抗體 Anti-PBX1
類(lèi)固醇5α還原酶1抗體(5α-Reductase 1) Anti-SRD5A1
磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體
phospho-ROCK2
(Thr249)
嗅覺(jué)受體52J3抗體
OR52J3
WNK4抗體 Anti-WNK4
NIPAL2蛋白抗體 Anti-NIPAL2
RIT1蛋白抗體 Anti-RIT1
細胞凋亡抑制因子抗體 Anti-Survivin
大鼠阿米洛利敏感鈉通道α亞基(SCNN1A)elisa分析檢測試劑盒
A431(A-431)人表皮癌細胞SCNN1A ELISA
kit
人花生四烯酸5脂氧合酶(ALOX5/LOG5)elisa分析檢測試劑盒
ALOX5/LOG5ELISAkit
小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)elisa檢測試劑盒
NAD-蘋(píng)果酸酶（NAD-ME）測試盒
石蠟切片組織GSK-3ALPHA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
牛1-磷脂酰肌醇-4,5
- 二磷酸磷酸二酯酶ζ1(PLCZ1)elisa檢測試劑盒
配體依賴(lài)核受體共抑制因子樣蛋白抗體
LCORL
細胞質(zhì)多聚腺苷酸結合蛋白4抗體
CPEB4
胰羧肽酶B1抗體 Carboxypeptidase B1
抑癌蛋白DKK3抗體 DKK3
多腺苷二磷酸多聚酶抗體(N端) PARP1
泛素羧基末端水解酶5互相作用蛋白1抗體 UCHL5IP
操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2：離心收集對數生長(cháng)期的細胞（貼壁細胞消化下來(lái)離心，懸浮細胞直接離心，轉速1200rpm或250g，時(shí)間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過(guò)夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉移至液氮長(cháng)期保存
方法二：使用無(wú)血清非程序凍存液
無(wú)血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無(wú)需自己配制，無(wú)需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒(méi)問(wèn)題后再批量應用。