產(chǎn)品名稱(chēng):羅氏溶液
規格:500ml
貨號:XG-RY2644
儲存條件:4℃,6個(gè)月
用途:主要用于定性鑒定人、動(dòng)物肝組織、肌肉組織等中酮體情況
注意事項:羅氏溶液是檢測肝臟的生酮作用實(shí)驗的成分之一,由氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、葡萄糖等組成。羅氏溶液常與亞硝基鐵氰化鈉配合使用,**紫色化合物,主要用于定性鑒定人、動(dòng)物肝組織、肌肉組織等中酮體情況。
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗、不得臨床。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng)
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規格
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貨號
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羅氏溶液500ml
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500ml
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XG-RY2644
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溶液的配制與標定的實(shí)驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱(chēng)量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感,避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時(shí)應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類(lèi)型,培養基,生長(cháng)條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實(shí)驗體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(kill curve),即劑量反應性曲線(xiàn),來(lái)確定佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細胞50-500μg/mL;植物細胞20-200μg/mL;300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線(xiàn)的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(劑量反應曲線(xiàn))來(lái)實(shí)現,至少選擇5個(gè)濃度。
1) 未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過(guò)夜;注:對于需要更高密度來(lái)檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類(lèi)型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度培養基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含培養基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細胞計數來(lái)確定阻止未轉染細胞生長(cháng)的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來(lái)傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)的殺傷。則當細胞過(guò)于稠密,其效率會(huì )降低。為了得到較好的篩選效果,將細胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有的篩選培養液。
3) 篩選7天后觀(guān)察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細胞類(lèi)型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。
標準溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標簽。
2 。在校正前,準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
標準品五大類(lèi):
1、化學(xué)成分類(lèi):標準物質(zhì),純的化合物或是有代表性的基體樣品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作農藥殘留分析的添加了殺蟲(chóng)劑的動(dòng)物脂肪),以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類(lèi):與目錄A相似的標準物質(zhì),但以一種或多種生化或臨床特性值表征,如酶活性。
3、物理特性類(lèi):以一種或多種物理特性值表征的標準物質(zhì),如熔點(diǎn)、粘性和密度。
4、工程特性類(lèi):以一種或多種工程特性值表征的標準物質(zhì),如硬度、拉伸強度和表面特性。
5、其他特性。這些類(lèi)別又被細分為三級子類(lèi),例如,在化學(xué)成分類(lèi)中,以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金,列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類(lèi)中;在化學(xué)成分類(lèi)別中,標準物質(zhì)還可進(jìn)一步被分為單一成分的標準物質(zhì)和基體標準物質(zhì)兩大類(lèi);單一成分的標準物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物),或純度、濃度、熔點(diǎn)、熔化焓值、粘度、紫外可見(jiàn)光吸光率、閃點(diǎn)等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液;這類(lèi)標準物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準。
膠質(zhì)系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養因子(GDNF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒冬蟲(chóng)夏草RalA Antibody
糖皮質(zhì)誘導的腫瘤壞死因子受體(GITR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒釀酒酵母AMPK Substrate Antibody Sampler Kit
糖皮質(zhì)類(lèi)固受體(GR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒哈茨木霉Ezh2 (AC22) Mouse mAb (PE Conjugate)
糖皮質(zhì)受體α(GRα)酶聯(lián)吸附測定試劑盒藍綠小四孢CD31 (PECAM-1) (89C2) Mouse mAb
糖皮質(zhì)受體β(GRβ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒釀酒酵母SDF1 (D32F9) Rabbit mAb
胰高血糖素(GC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒枯草芽孢桿Btk (C82B8) Rabbit mAb
葡萄糖激酶(GCK)酶聯(lián)吸附測定試劑盒短雙歧桿SFRP1 (D5A7) Rabbit mAb
糖蛋白130(gp130)酶聯(lián)吸附測定試劑盒西班牙糖絲GATA-1 (D52H6) XP® Rabbit mAb
葡萄糖6磷酸脫氫酶(G6PD)酶聯(lián)吸附測定試劑盒匍枝根霉原變種GATA-1 (D52H6) XP® Rabbit mAb
葡萄糖轉運蛋白3(Glut3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒桂花地霉eNOS (D8A6N) Rabbit mAb
葡萄糖轉運蛋白4(Glut4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒竹喙球β-Amyloid (D54D2) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 594 Conjugate)
β葡萄糖苷酸酶(GUSb)酶聯(lián)吸附測定試劑盒黃柄曲霉CD7 Antibody
谷氨酸半胱氨酸連接酶修飾亞基(GCLM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒鮭色鎖擲酵母CD27 (O323) Mouse mAb (FITC Conjugate)
谷氨酸脫羧酶2(GAD 2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒DeinococcusPhospho-Btk (Ser180) (3D3) Mouse mAb
谷氨酸脫氫酶(GDH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒藤黃孢鏈霉GLI1 (C68H3) Rabbit mAb
羅氏溶液500ml小鼠肌鈣蛋白TAnti-MRPL54 Antibody人8-羥基鳥(niǎo)嘌呤糖苷酶1(OGG1)elisa檢測試劑盒
大鼠吡啶酚Anti-MRPL54 Antibody人絲氨酸/蘇氨酸激酶39(STK39)elisa檢測試劑盒
麥胚凝集素/凝集蛋白Anti-MRPL9 Antibody人糖化血清蛋白(GSP)elisa檢測試劑盒
人生長(cháng)釋放因子Anti-MRPL51 Antibody人生長(cháng)調節致癌基因β(GROβ)elisa檢測試劑盒
大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2Anti-MRPS16 Antibody人生長(cháng)結合蛋白(GHR/P)elisa檢測試劑盒
小鼠c-fosAnti-MRPS18C Antibody人精氨酸酶(ARG2)elisa檢測試劑盒
荊豆凝集素Anti-MRPS12 Antibody人食欲素B/阿立新B(OXB)elisa檢測試劑盒
兔血栓素B2Anti-MRPS17 Antibody人髓過(guò)氧化物酶抗體(Anti-MPO)elisa檢測試劑盒