上海西格生物科技有限公司 主營(yíng):生化試劑,標準品,對照品,PCR試劑盒,?核酸檢測試劑盒,熒光定量檢測試劑盒,生化試劑盒?,比色法試劑盒,酶活性檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免yi檢測試劑盒,試劑盒,ELISA試劑盒,抗體,重組蛋白,分光光度法檢測試劑盒,細胞株,原代細胞,細胞培養基,標準溶液產(chǎn)品。代理并銷(xiāo)售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
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蛋白酶抑制劑混合液1ml

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  • 產(chǎn)品名稱(chēng):蛋白酶抑制劑混合液1ml
  • 產(chǎn)品型號:XG-RY2424
  • 產(chǎn)品展商:西格
  • 產(chǎn)品文檔:無(wú)相關(guān)文檔
簡(jiǎn)單介紹

蛋白酶抑制劑混合液1ml實(shí)驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。

產(chǎn)品描述

公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗、不得臨床。

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規格

貨號

蛋白酶抑制劑混合液1ml

1ml

XG-RY2424

產(chǎn)品名稱(chēng):蛋白酶抑制劑混合液

規格:1ml

貨號:XG-RY2424

儲存條件:—20℃,避光,12個(gè)月

用途:蛋白酶抑制劑

注意事項:主要由亮抑酶肽、胰凝乳蛋白酶抑制劑、抑胃肽酶A、PMSF等組成。
標準溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標簽。
2 。在校正前,準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
標準品五大類(lèi):
1、化學(xué)成分類(lèi):標準物質(zhì),純的化合物或是有代表性的基體樣品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作農藥殘留分析的添加了殺蟲(chóng)劑的動(dòng)物脂肪),以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類(lèi):與目錄A相似的標準物質(zhì),但以一種或多種生化或臨床特性值表征,如酶活性。
3、物理特性類(lèi):以一種或多種物理特性值表征的標準物質(zhì),如熔點(diǎn)、粘性和密度。
4、工程特性類(lèi):以一種或多種工程特性值表征的標準物質(zhì),如硬度、拉伸強度和表面特性。
5、其他特性。這些類(lèi)別又被細分為三級子類(lèi),例如,在化學(xué)成分類(lèi)中,以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金,列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類(lèi)中;在化學(xué)成分類(lèi)別中,標準物質(zhì)還可進(jìn)一步被分為單一成分的標準物質(zhì)和基體標準物質(zhì)兩大類(lèi);單一成分的標準物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物),或純度、濃度、熔點(diǎn)、熔化焓值、粘度、紫外可見(jiàn)光吸光率、閃點(diǎn)等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液;這類(lèi)標準物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準。

溶液的配制與標定的實(shí)驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱(chēng)量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感,避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時(shí)應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。

 短蛋白聚糖(BCAN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒大腸桿Rab7 (D95F2) XP® Rabbit mAb (HRP Conjugate)

金屬硫蛋白1M (MT1M)酶聯(lián)吸附測定試劑盒鮭色沉積物桿狀Exportin 5 (D7W6W) Rabbit mAb

血小板球蛋白β(βTG)酶聯(lián)吸附測定試劑盒籃狀屬Phospho-Vimentin (Ser83) (D5A2D) Rabbit mAb

金屬硫蛋白3 (MT3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒平菇Phospho-p53 (Ser15) (D4S1H) Rabbit mAb (Rodent Specific)

C型鈉尿肽(CNP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 三葉草根瘤Phospho-p53 (Ser15) (D4S1H) Rabbit mAb (Rodent Specific)

抗補體1q抗體(C1q-Ab)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  毛柄(金針菇)Phospho-p53 (Ser15) (D4S1H) Rabbit mAb (Rodent Specific)

C4結合蛋白(C4BP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 異常漢遜酵母異常變種LIN28A (D1A1A) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)

粘蛋白13(MUC13)酶聯(lián)吸附測定試劑盒土曲霉DAG Lipase β (D4P7C) Rabbit mAb

腫瘤標志物CA724(CA724)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 釀酒酵母E-Ras (D5G5J) Rabbit mAb

粘蛋白1(MUC1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒凍土毛霉Cleaved Histone H3 (Thr22) (D7J2K) Rabbit mAb

鈣調磷酸酶結合蛋白1(CABIN1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 硬炭團USP13 (D4P3M) Rabbit mAb

鈣調磷酸酶(CaN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 泛養副球TBP (D5G7Y) Rabbit mAb

降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 菲爾德斯半島擬諾卡氏Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase (G6PD) Activity Assay Kit

降鈣素受體(CTR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 米曲霉ELAVL1/HuR (D9W7E) Rabbit mAb

鈣敏感受體(CaSR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒還原硫酸鹽互營(yíng)桿*Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)

蛋白酶抑制劑混合液1mlp53凋亡激蛋白1抗原Anti-BLZF1 Antibody諾氟沙星Norfloxacin

P53凋亡激蛋白2抗原Anti-BPIFA4P Antibody4-差向金霉素4 -?ECTC

神經(jīng)束蛋白-155Anti-BRD3 Antibody頭孢哌酮雜質(zhì)A(降B)Cefoperazone impurity A?(reduced?B)

神經(jīng)生長(cháng)因子-β(多肽片斷抗原)Anti-BRCA1 Antibody克林霉素Clindamycin

血管緊張素I抗原Anti-BPIFA4P Antibody3-甲基利福霉素SV3 - methyl?rifamycin SV

神經(jīng)生長(cháng)因子受體(抗原)Anti-BRD4 Antibody頭孢哌酮S異構體Cefoperazone?S isomers

血管緊張素Ⅱ-1型受體抗原Anti-BRE Antibody阿莫西林Amoxicillin

血管緊張素Ⅱ-1型受體抗原Anti-BRF1 Antibody脫水四環(huán)素Tetracycline

使用方法:
1.  常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類(lèi)型,培養基,生長(cháng)條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實(shí)驗體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(kill curve),即劑量反應性曲線(xiàn),來(lái)確定佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細胞50-500μg/mL;植物細胞20-200μg/mL;300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線(xiàn)的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(劑量反應曲線(xiàn))來(lái)實(shí)現,至少選擇5個(gè)濃度。
1)  未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過(guò)夜;注:對于需要更高密度來(lái)檢測活力的細胞,可增加接種量。
2)  根據細胞類(lèi)型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3)  替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度培養基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4)  接下來(lái)每3-4天更換新的含培養基。
5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細胞計數來(lái)確定阻止未轉染細胞生長(cháng)的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3.   穩定轉染細胞的篩選
1)  轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來(lái)傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)的殺傷。則當細胞過(guò)于稠密,其效率會(huì )降低。為了得到較好的篩選效果,將細胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2)   每隔3-4天更換含有的篩選培養液。
3)  篩選7天后觀(guān)察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細胞類(lèi)型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。

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