產(chǎn)品名稱(chēng)：一步法凝膠制備試劑盒
規格：10T
貨號：XG-RY2418
儲存條件：4℃,避光,6個(gè)月
用途：本產(chǎn)品對傳統SDS丙烯酰胺凝膠改良優(yōu)化，形成了相應濃度的分離膠和4.5%的濃縮膠溶液，使用時(shí)您只需要加入過(guò)硫酸銨和TEMED即可，分離膠和濃縮膠同時(shí)灌入玻璃板，然后插入梳子，操作十分簡(jiǎn)單。傳統的SDS-PAGE膠由于不能長(cháng)期存放，需要現用現配，所以費時(shí)費力。本試劑盒提供的中性緩沖液系統，可幫助您輕松制備可長(cháng)期存放的并且具有高分辨率的預制膠，所以您可以在短時(shí)間內同時(shí)制備大量可長(cháng)期存放的高質(zhì)量凝膠，以備不時(shí)之需。另外，利用本系統制備的預制膠，可高效兼容傳統的電泳/轉膜
液。（）
注意事項：切記：不需要等分離膠凝固之后再加濃縮膠；加入分離膠之后立即就加濃縮膠，也不需要加水壓線(xiàn)
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗、不得臨床。
產(chǎn)品屬性：
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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規格
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貨號
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一步法凝膠制備試劑盒10T
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10T
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XG-RY2418
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溶液的配制與標定的實(shí)驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱(chēng)量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感，避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時(shí)應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來(lái)篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類(lèi)型，培養基，生長(cháng)條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實(shí)驗體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（kill curve），即劑量反應性曲線(xiàn)，來(lái)確定佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動(dòng)物細胞50-500μg/mL；植物細胞20-200μg/mL；300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線(xiàn)的建立
注意：為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（劑量反應曲線(xiàn)）來(lái)實(shí)現，至少選擇5個(gè)濃度。
1） 未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上，37℃，CO2培養過(guò)夜；注：對于需要更高密度來(lái)檢測活力的細胞，可增加接種量。
2） 根據細胞類(lèi)型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3） 替換舊的培養基，換用新鮮配制的含有相應濃度培養基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4） 接下來(lái)每3-4天更換新的含培養基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細胞計數來(lái)確定阻止未轉染細胞生長(cháng)的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1） 轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來(lái)傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)的殺傷。則當細胞過(guò)于稠密，其效率會(huì )降低。為了得到較好的篩選效果，將細胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2） 每隔3-4天更換含有的篩選培養液。
3） 篩選7天后觀(guān)察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細胞類(lèi)型，轉染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細胞培養板，繼續用含的篩選培養液維持培養7天。
5） 之后更換正常培養基培養即可。
標準溶液配制：
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中，充分溶解，用兩支玻璃瓶密封保存，做 好標簽。
2 。在校正前，準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏：取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分攪拌。
4 。256毫伏：取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
標準品五大類(lèi)：
1、化學(xué)成分類(lèi)：標準物質(zhì)，純的化合物或是有代表性的基體樣品，天然的或添加(被)分析物的(如，用作農藥殘留分析的添加了殺蟲(chóng)劑的動(dòng)物脂肪)，以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類(lèi)：與目錄A相似的標準物質(zhì)，但以一種或多種生化或臨床特性值表征，如酶活性。
3、物理特性類(lèi)：以一種或多種物理特性值表征的標準物質(zhì)，如熔點(diǎn)、粘性和密度。
4、工程特性類(lèi)：以一種或多種工程特性值表征的標準物質(zhì)，如硬度、拉伸強度和表面特性。
5、其他特性。這些類(lèi)別又被細分為三級子類(lèi)，例如，在化學(xué)成分類(lèi)中，以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金，列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類(lèi)中；在化學(xué)成分類(lèi)別中，標準物質(zhì)還可進(jìn)一步被分為單一成分的標準物質(zhì)和基體標準物質(zhì)兩大類(lèi)；單一成分的標準物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物)，或純度、濃度、熔點(diǎn)、熔化焓值、粘度、紫外可見(jiàn)光吸光率、閃點(diǎn)等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液；這類(lèi)標準物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準。
載脂蛋白A5(ApoA5)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 釀酒酵母Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)
載脂蛋白B100(ApoB100)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 德氏乳桿保加利亞亞種SOS1 (D3T7T) Rabbit mAb
拮抗凋亡轉錄因子(AATF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒糞產(chǎn)堿p44/42 MAPK (Erk1/2) Blocking Peptide (#4695 Specific)
肝脂酶 (LIPC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒根瘤SignalSilence® p27 Kip1 siRNA II
凋亡誘導因子(AIF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 毛頭鬼傘Immunofluorescence Blocking Buffer
胃脂酶 (LIPF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒丁香尾孢PAX3 Antibody
凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 白僵α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb (HRP Conjugate)
凋亡信號調節激酶I(ASK-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 枝孢屬SignalSilence® UCHL1 siRNA II
堿性成纖維生長(cháng)因子(bFGF/FGF2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒溶淀粉類(lèi)芽孢桿CARD9 Antibody
抑肽酶(AP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 新城疫病CK1δ Antibody
異常凝血酶原(APT)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 木材游動(dòng)四孢NLRC4 (D5Y8E) Rabbit mAb
中間α球蛋白抑制因子H4(ITIH4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒裂褶IL-1β (D4T2D) Rabbit mAb (Mouse Specific)
水通道蛋白1(AQP-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 柱形孢鏈霉Phospho-Smad1 (Ser463/465)/ Smad5 (Ser463/465)/ Smad9 (Ser465/467) (D5B10) Rabbit mAb (PE Conjugate)
水通道蛋白2(AQP-2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 傳染性****病Smad1 (D59D7) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)
水通道蛋白3(AQP-3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 土庫曼野野村氏Phospho-Src (Ser17) (D7F2Q) Rabbit mAb
一步法凝膠制備試劑盒10T艾滋病?。乖?/span>Anti-B4GALT3 Antibody山楂（山楂）Hawthorn?（Crataegus）
熱休克蛋白-60（抗原）Anti-B4GALT1 Antibody紫蘇子Zi Suzi
熱休克蛋白-70（多肽抗原）Anti-B4GALT3 Antibody大腹皮Pericarpium Arecae
銜接蛋白α抗原Anti-B4GALT5 Antibody使君子（使君子仁）Idolkimi
Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑（抗原）Anti-BACH2 Antibody桃仁（山桃）Peach?（Prunus）
胰島素降解酶（抗原）Anti-BAG1 Antibody阿米卡星Amikacin
人胰島素樣生長(cháng)因子-I受體Anti-BAG4 Antibody高山紅景天Rhodiola sachalinensis
胰島素樣生長(cháng)因子結合蛋白-5(抗原)Anti-BAGE2 Antibody鹿茸（馬鹿）Pilose antler?（red deer）