產(chǎn)品名稱(chēng):ELISA封閉液
規格:100ml
貨號:XG-RY2204
儲存條件:4℃,6個(gè)月
用途:占據固相化過(guò)程的空白點(diǎn),以減少非特異性反應。
注意事項:由磷酸鹽、明膠等組成。
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗、不得臨床。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng)
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規格
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貨號
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ELISA封閉液100ml
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100ml
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XG-RY2204
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溶液的配制與標定的實(shí)驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱(chēng)量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感,避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時(shí)應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類(lèi)型,培養基,生長(cháng)條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實(shí)驗體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(kill curve),即劑量反應性曲線(xiàn),來(lái)確定佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細胞50-500μg/mL;植物細胞20-200μg/mL;300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線(xiàn)的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(劑量反應曲線(xiàn))來(lái)實(shí)現,至少選擇5個(gè)濃度。
1) 未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過(guò)夜;注:對于需要更高密度來(lái)檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類(lèi)型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度培養基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含培養基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細胞計數來(lái)確定阻止未轉染細胞生長(cháng)的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來(lái)傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)的殺傷。則當細胞過(guò)于稠密,其效率會(huì )降低。為了得到較好的篩選效果,將細胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有的篩選培養液。
3) 篩選7天后觀(guān)察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細胞類(lèi)型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。
標準溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標簽。
2 。在校正前,準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
標準品五大類(lèi):
1、化學(xué)成分類(lèi):標準物質(zhì),純的化合物或是有代表性的基體樣品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作農藥殘留分析的添加了殺蟲(chóng)劑的動(dòng)物脂肪),以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類(lèi):與目錄A相似的標準物質(zhì),但以一種或多種生化或臨床特性值表征,如酶活性。
3、物理特性類(lèi):以一種或多種物理特性值表征的標準物質(zhì),如熔點(diǎn)、粘性和密度。
4、工程特性類(lèi):以一種或多種工程特性值表征的標準物質(zhì),如硬度、拉伸強度和表面特性。
5、其他特性。這些類(lèi)別又被細分為三級子類(lèi),例如,在化學(xué)成分類(lèi)中,以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金,列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類(lèi)中;在化學(xué)成分類(lèi)別中,標準物質(zhì)還可進(jìn)一步被分為單一成分的標準物質(zhì)和基體標準物質(zhì)兩大類(lèi);單一成分的標準物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物),或純度、濃度、熔點(diǎn)、熔化焓值、粘度、紫外可見(jiàn)光吸光率、閃點(diǎn)等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液;這類(lèi)標準物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準。
β- Amyloid (2-40)Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly-Val-Val
β- Amyloid (37- 43)Gly-Gly-Val-Val-Ile-Ala-Thr
β- Amyloid (4-10)Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr
β- Amyloid (8-38)Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly
β- Amyloid Protein Precursor 770 (135-155)Phe-Leu-His-Gln-Glu-Arg-Met-Asp-Val-Cys-Glu-Thr-His-Leu-His-Trp-His-Thr-Val-Ala-Lys
β I probeSer-Arg-Glu-Trp-Glu-Asp-Gly-Phe-Gly-Gly-Arg-Trp-Leu-Ser-Arg
β II probeSer-Ser-Leu-Asp-Leu-Ser-Gln-Phe-Pro-Met-Thr-Ala-Ser-Phe-Leu-Arg-Glu-Ser-Arg
β III probeSer-Ser-Glu-Ala-Cys-Val-Gly-Arg-Trp-Met-Leu-Cys-Glu-Gln-Leu-Gly-Val-Ser-Arg
β- MSH, porcineAsp-Glu-Gly-Pro-Tyr-Lys-Met-Glu-His-Phe-Arg-Trp-Gly-Ser-Pro-Pro-Lys-Asp
β-Amyloid (35-25)Met-Leu-Gly-Ile-Ile-Ala-Gly-Lys-Asn-Ser-Gly
β-Amyloid (10-20)Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe
Anti-SLC24A5/FITC 熒光素標記可溶性載質(zhì)轉運蛋白SLC24A5抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
BrdU (Bromodeoxyuridine) 溴脫氧尿苷Multi-class antibodies規格: 50mg
谷氨酸受體1抗體 Anti-NR1/NMDAR1 0.1ml
2,4-D(24D1) 英文名稱(chēng): 2,4-二氯苯氧乙酸(除草劑)單克隆抗體 0.1ml
ERK5 英文名稱(chēng): 細胞外信號調節激酶5抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-P53(Ser315) 磷酸化抑制基因P53抗體 規格 0.1ml
BrdU (Bromodeoxyuridine) 溴脫氧尿苷Multi-class antibodies規格: 50mg
Anti-TBX2/T-box2/FITC 熒光素標記新型抑癌基因抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Integrin Beta chain (ITG- Beta3/ITGB3) 整合素-β3(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
臂板蛋白3F抗體 Anti-Sema3F 0.2ml
SKP2 英文名稱(chēng): 細胞S期激酶相關(guān)蛋白2抗體 0.1ml
EBP1 英文名稱(chēng): erbB3結合蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MEF2C(Ser387) 磷酸化肌細胞增強因子2C抗體 規格 0.1ml
Integrin Beta chain (ITG- Beta3/ITGB3) 整合素-β3(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
ELISA封閉液100ml十二烷基二甲基乙基溴化shēng huà shì jì容量:1克
108-31-6順丁烯二酸酐;失水蘋(píng)果酸酐;2,5-呋喃二酮;馬來(lái)酸酐;順酐;二氫-2,5-二氧代呋喃;馬來(lái)酐;順丁二酸酐MA;cis-Butenedioic anhydride;Toxilic anhydride;2,5-Furandione
碳酸和基酸混合物,英文名或英文縮寫(xiě):Ammonium caonate,級別:AR,99%,規格:1公斤
2--5-硝基三 2-Chloro-5-nitrobenzotrifluoride,97% 777-37-7 25G 通用試劑
堿性磷酸酶染液/cAKP stain 可染20-30片 1套 國產(chǎn)
SCCRAM肉湯shēng huà shì jì容量:RT250克
1993-7-23.4-二甲氧基本3,4-Dimetxoxybenzoic acid
氧化銀5克RT,避光
基炳烯醋2-(三基硅氧基)酯(含穩定劑BHT) 2-(TRIMqTHYLSILOXY)qTHYL MqTHcCRYLcTq 17407-09-9
氫氧化鈣500克
4-溴聯(lián)本shēng huà shì jì容量:500克
69712-56-7頭孢替坦Cefotetan
4-N-Hexylpxenylboronic acid 105365-50-2
丁位壬內酯 δ-Nonalactone,98% 3301-94-8 25G 通用試劑
土霉素/地霉素/氧四環(huán)素/4-二甲基-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-八氫-3,5,6,10,12,12a-六羥基-6-甲基-1,11-二氧代-并四苯-2-/Terramycin USP級,930u/mg, 25/100/500克 國產(chǎn)/