抗體的鑒定:產(chǎn)品僅用于科研
1)抗體的效價(jià)鑒定:不管是用于診斷還是用于制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴散試驗來(lái)鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來(lái)表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線(xiàn),計算各自的結合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
人神經(jīng)降壓素(NT)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱(chēng):Neurotensin, NT Human NT(Neurotensin) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測人血清、血漿或其他相關(guān)生物液體中天然及部分重組NT濃度。
產(chǎn)品名稱(chēng)
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規格
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貨號
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上海Anti-Spindly/CCDC99西格抗體
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0.2ml/200μg
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XG-01K87849
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英文名稱(chēng) Anti-Spindly/CCDC99
中文名稱(chēng) 亞砷鹽相關(guān)蛋白抗體
濃 度 1mg/1ml
規 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
研究領(lǐng)域 細胞生物 學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 67kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Protein Spindly
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 Rrhabdomyosarcoma antigen protein MU RMS 40.4A; Arsenite related gene 1 protein; Arsenite-related gene 1 protein; CCDC 99; Ccdc99; Coiled coil domain containing 99; Coiled-coil domain-containing protein 99; hSpindly; Protein Spindly; rhabdomyosarcoma antigen MU RMS 40.4A; Rhabdomyosarcoma antigen MU-RMS-40.4A; SPDLY_HUMAN; Spindly.
稀釋方法:
方法1. 實(shí)驗前,將凍干粉抗體用無(wú)菌蒸餾水稀釋?zhuān)ɑ?/span>PBS稀釋?zhuān)?,將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復凍溶。
方法2. 實(shí)驗前,也可將凍干粉抗體用無(wú)菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 預試驗可做幾個(gè)梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個(gè)好的稀釋比例,再正式做,工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
石蠟切片和冰凍切片的比較
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是今天我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時(shí)要高溫烤片,可能會(huì )破壞組織的抗原 性,如果組織的抗原性較穩定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。
(2)冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能夠較好的保存組織的抗原活性,做化 時(shí)不需抗原修復這一步。缺點(diǎn)是細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構,可能會(huì )使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒(méi)石蠟的漂亮。當你買(mǎi)一抗時(shí),目錄上都寫(xiě)著(zhù)做什么樣的切片,如果它寫(xiě)著(zhù)只能做冰凍,就不能做石蠟,如寫(xiě)著(zhù)兩者都可,那就都能做。
(3)石蠟切片的優(yōu)點(diǎn)可以保持組織細胞的形態(tài)結構,且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,一定要存在-80度的低溫冰箱中,尤其是用來(lái)做原位雜交 的的切片,為了防止RNA降解,保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,容易成功,而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。
實(shí)驗要點(diǎn):
1.產(chǎn)品名稱(chēng)如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì )抑制標記反應。因此,蛋白質(zhì)在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì )有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個(gè)不同的分子比來(lái)篩選適條件;
3.用NHSB量過(guò)量也是不利的,抗原的結合位點(diǎn)可能因此被封閉,導致抗體失活;
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;
5.當游離ε-氨基(賴(lài)氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會(huì )降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性;
6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結合;
7.交聯(lián)反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會(huì )對生物素化抗體與親和素的結合產(chǎn)生競爭作用;
8.在細胞的熒光標記實(shí)驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。
Abz-G-p-nitro-Phe-P-OH Granuliberin-R Ac-Lys-(D-Ala)2 -OH AAA (D-Ala7)-AngiotensinI/II (1-7)
APLP1-derived Aβ -like peptide (1-28), APL1β 28 Alytesin D-AAAAAA Dnp-Pro-TNF-α (71-82)amide (human) Angiotensin I/II (1-7)
Atrial Natriuretic Peptide (126-149) (rat) DF-2 Apelin-13 (human,bovine, mouse, rat) Antho-RWamide I Angiotensin I/II (1-6)
(Arg6,β -cyclohexyl-Ala8,D-Tic16,Arg17,Cys18)- Atrial Natri H-β -Asp-Phe-OH Apelin-12,(Des-Gln1)-Apelin-13 Antho-RPamide II Angiotensin I/II (1-5)
Atrial Natriuretic Factor (4-28) (human, bovine, porcine) β -Aspartame, H-β -Asp-Phe-Ome Anxiety Peptide,Octadecaneuropeptide, ODN Antho-RPamide I Angiotensin II Receptor Ligand
2,4,5-T-iso-octyl ester (technical),certi Carbondisulfide 25168-15-4 純品型,0.1G 特征形態(tài) 固態(tài)
2,4,5-T-2-ethylhexyl ester,certified 標準 Carbofuran-3-hydroxy 1928-47-8 純品型,250MG 特征形態(tài) 固態(tài)
2,4,5-T-1-butyl ester,certified 標準品 Acrylicacid-methylester 93-79-8 純品型,0.1g 特征形
上海Anti-Spindly/CCDC99西格抗體Tolazoline 中文名:鹽酸妥拉唑林 分子式:C10H13ClN2 度:98.0% 兔子細胞間粘附分子2elisa試劑盒 兔子細胞間粘附分子2試劑盒 規格型號:96T/48T 兔子細胞間粘附分子2試劑盒,規格型號:96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子細胞間粘附分子2試劑盒、兔子細胞間粘附分子2eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Meclizine 中文名:鹽酸美克洛嗪 分子式:C25H29Cl3N2 度:98.0%
應用于IHC、WB、 IF、IP、ELISA等實(shí)驗,質(zhì)量保證,無(wú)效免費退換,另外本公司長(cháng)期供應化抗體、WB抗體、化試劑盒和抗體試驗所需全部相關(guān)試劑、熒光標記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗抗體。