抗體的鑒定:產(chǎn)品僅用于科研
1)抗體的效價(jià)鑒定:不管是用于診斷還是用于制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴散試驗來(lái)鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來(lái)表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線(xiàn),計算各自的結合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱(chēng):FRAP1, RAFT1, RAPT1, Mechanistic target of rapamycin, FK506 binding protein 12-rapamycin associated protein 1 Human mTOR(Mammalian Target of Rapamycin) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組mTOR濃度
產(chǎn)品名稱(chēng)
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規格
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貨號
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上海Anti-SIRT3西格抗體
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0.2ml/200μg
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XG-01K87673
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英文名稱(chēng) Anti-SIRT3
中文名稱(chēng) 線(xiàn)粒體乙?;?/span>3抗體
濃 度 1mg/1ml
規 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Rabbit
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 細胞生物 細胞周期蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 43kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human SIRT3
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 hSIRT3; hSIRT 3; hSIRT3; Mitochondrial nicotinamide adenine dinucleotide dependent deacetylase; NAD dependent deacetylase sirtuin 3 mitochondrial; NAD-dependent deacetylase sirtuin-3, mitochondrial; Silent mating type information regulation 2 S.cerevisiae homolog 3; Sir 2 like 3; SIR 2 like protein 3; SIR 3; SIR2 L3; Sir2 like 3; SIR2 like protein 3; SIR2-like protein 3; SIR2L3; SIRT 3; SIRT3; SIRT3_HUMAN; Sirtuin 3; Sirtuin silent mating type information regulation 2 homolog 3 (S. cerevisiae); Sirtuin type 3; Sirtuin3.
稀釋方法:
方法1. 實(shí)驗前,將凍干粉抗體用無(wú)菌蒸餾水稀釋?zhuān)ɑ?/span>PBS稀釋?zhuān)?,將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復凍溶。
方法2. 實(shí)驗前,也可將凍干粉抗體用無(wú)菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 預試驗可做幾個(gè)梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個(gè)好的稀釋比例,再正式做,工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
石蠟切片和冰凍切片的比較
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是今天我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時(shí)要高溫烤片,可能會(huì )破壞組織的抗原 性,如果組織的抗原性較穩定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。
(2)冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能夠較好的保存組織的抗原活性,做化 時(shí)不需抗原修復這一步。缺點(diǎn)是細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構,可能會(huì )使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒(méi)石蠟的漂亮。當你買(mǎi)一抗時(shí),目錄上都寫(xiě)著(zhù)做什么樣的切片,如果它寫(xiě)著(zhù)只能做冰凍,就不能做石蠟,如寫(xiě)著(zhù)兩者都可,那就都能做。
(3)石蠟切片的優(yōu)點(diǎn)可以保持組織細胞的形態(tài)結構,且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,一定要存在-80度的低溫冰箱中,尤其是用來(lái)做原位雜交 的的切片,為了防止RNA降解,保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,容易成功,而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。
實(shí)驗要點(diǎn):
1.產(chǎn)品名稱(chēng)如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì )抑制標記反應。因此,蛋白質(zhì)在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì )有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個(gè)不同的分子比來(lái)篩選適條件;
3.用NHSB量過(guò)量也是不利的,抗原的結合位點(diǎn)可能因此被封閉,導致抗體失活;
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;
5.當游離ε-氨基(賴(lài)氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會(huì )降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性;
6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結合;
7.交聯(lián)反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會(huì )對生物素化抗體與親和素的結合產(chǎn)生競爭作用;
8.在細胞的熒光標記實(shí)驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。
大內皮素-1(1-38),人 Big Endothelin-1 (1-38), human 質(zhì)量規格:>95%,BR 英文名稱(chēng)MouseHistamineElisakit小鼠組胺(Histamine)規格:96T/48T
大內皮素-1 (1-39),豬 Big Endothelin -1 (1-39),porcine 質(zhì)量規格:>95%,BR PDGF-A(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
腦鈉素-32,大鼠 BNP-32, rat 質(zhì)量規格:>95%,BR PorcineSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISA試劑盒豬可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒規格:96T/48T
鈴蟾肽 Bombesin 質(zhì)量規格:>95%,BR 小鼠分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)ELISA試劑盒 ,英文名: SFRP5 ELISA Kit
緩激肽 Bradykinin 質(zhì)量規格:>95%,BR 人抗脫氧核糖核蛋白抗體(DNP-Ab)ELISA檢測試劑盒Humandeoxyribonucleicproteinaibody,DNP-AbELISAKit 96T/48T
緩激肽(1-5) Bradykinin (1-5) 質(zhì)量規格:>95%,BR 大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)試劑盒 Rat Heat Shock Protein glycoprotein 96,HSP gp96 ELISA Kit
緩激肽(1-6) Bradykinin (1-6) 質(zhì)量規格:>95%,BR 英文名稱(chēng)RatET-1Elisakit大鼠內皮素1(ET-1)Elisakit規格:96T/48T
緩激肽(1-7) Bradykinin (1-7) 質(zhì)量規格:>95%,BR 基因甲基化特異性PCR擴增(MSP)試劑盒60
頰肽 Buccalin 質(zhì)量規格:>95%,BR ELISAKitICAM-1/CD54人細胞間粘附分子1規格:48T/96T
酶,雞 Calcitonin, chicken 質(zhì)量規格:>95%,BR 小鼠分泌型卷曲相關(guān)蛋白4(SFRP4)ELISA試劑盒 ,英文名: SFRP4 ELISA Kit
2,4,5,6-四氯-間二甲苯 標準品 Buprofezin 877-09-8 純品型,0.1g 特征形態(tài) 固態(tài)
α,α,2,6-四氯甲苯標準品 TerbutrynD5(ethylD5) 81-19-6 純品型,1G 特征形態(tài) 固態(tài)
a,a,a-4-四氯甲苯 標準品 a,a,a-4-Tetrachlorotoluene 5216-25-1 純品型,1g 特征形態(tài) 固態(tài)
上海Anti-SIRT3西格抗體Diethyl 2-acetamido-2-(4-octylphenethyl)malonate 162358-08-9 中文名: 分子式:C25H39NO5 組織IKKβ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Tropisetron 105826-92-4 中文名:鹽酸托烷司瓊 分子式:C17H21ClN2O2 Humanplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒規格:96T/48T
應用于IHC、WB、 IF、IP、ELISA等實(shí)驗,質(zhì)量保證,無(wú)效免費退換,另外本公司長(cháng)期供應化抗體、WB抗體、化試劑盒和抗體試驗所需全部相關(guān)試劑、熒光標記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗抗體。