抗體的鑒定:產(chǎn)品僅用于科研
1)抗體的效價(jià)鑒定:不管是用于診斷還是用于制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴散試驗來(lái)鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來(lái)表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線(xiàn),計算各自的結合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
人晶狀體蛋白αB(CRYαB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱(chēng):CRYAB, CMD1II, CRYA2, CTPP2, HSPB5 Human CRYαB(Crystallin Alpha B) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組CRYαB濃度
產(chǎn)品名稱(chēng)
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規格
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貨號
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上海Anti-UCN2/Urotensin II抗體價(jià)格
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0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
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XG-01K87595
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英文名稱(chēng) Anti-UCN2/Urotensin II
中文名稱(chēng) 尾加壓素2抗體
濃 度 1mg/1ml
規 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 信號轉導 生長(cháng)因子和
蛋白分子量 predicted molecular weight: 12kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human UCN2/Urotensin II
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應用 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 Urotensin II; PRO1068; U-II; UCN2; UII; Urotensin 2 preproprotein isoform a; Urotensin 2 preproprotein isoform b; UrotensinII; Urotensin-II; Urotensin-2; Urotensin 2; Urotensin2; UTS2; UTS2_HUMAN; UTSII.
稀釋方法:
方法1. 實(shí)驗前,將凍干粉抗體用無(wú)菌蒸餾水稀釋?zhuān)ɑ?/span>PBS稀釋?zhuān)?,將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復凍溶。
方法2. 實(shí)驗前,也可將凍干粉抗體用無(wú)菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 預試驗可做幾個(gè)梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個(gè)好的稀釋比例,再正式做,工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
石蠟切片和冰凍切片的比較
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是今天我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時(shí)要高溫烤片,可能會(huì )破壞組織的抗原 性,如果組織的抗原性較穩定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。
(2)冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能夠較好的保存組織的抗原活性,做化 時(shí)不需抗原修復這一步。缺點(diǎn)是細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構,可能會(huì )使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒(méi)石蠟的漂亮。當你買(mǎi)一抗時(shí),目錄上都寫(xiě)著(zhù)做什么樣的切片,如果它寫(xiě)著(zhù)只能做冰凍,就不能做石蠟,如寫(xiě)著(zhù)兩者都可,那就都能做。
(3)石蠟切片的優(yōu)點(diǎn)可以保持組織細胞的形態(tài)結構,且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,一定要存在-80度的低溫冰箱中,尤其是用來(lái)做原位雜交 的的切片,為了防止RNA降解,保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,容易成功,而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。
實(shí)驗要點(diǎn):
1.產(chǎn)品名稱(chēng)如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì )抑制標記反應。因此,蛋白質(zhì)在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì )有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個(gè)不同的分子比來(lái)篩選適條件;
3.用NHSB量過(guò)量也是不利的,抗原的結合位點(diǎn)可能因此被封閉,導致抗體失活;
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;
5.當游離ε-氨基(賴(lài)氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會(huì )降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性;
6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結合;
7.交聯(lián)反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會(huì )對生物素化抗體與親和素的結合產(chǎn)生競爭作用;
8.在細胞的熒光標記實(shí)驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。
鹽酸酪胺 Tyramine 質(zhì)量規格:>97%,BR Rat parathyroid hormone related protein (PTHrP) ELISA Kit 大鼠甲狀旁腺相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒
糠酸(>97%,BR) 2-Furoic acid 質(zhì)量規格:>97%,BR Humandynorphin,DynELISAKit 人強啡肽(Dyn)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
2-甲基咪唑(>98%,BR) 2-Methylimidazole 質(zhì)量規格:>98%,BR Human25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISA試劑盒人25羥基維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA試劑盒規格:96T/48T
6-氯嘌呤(>98%,BR) 6-Chloropurine 質(zhì)量規格:>98%,BR /酵母纖維素酶(cellulase)活性比色法定量檢測試劑盒20
Big CHAP(>98%,BR) Big CHAP 質(zhì)量規格:>98%,BR MouseApolipoproteinE,Apo-EELISAKit小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒規格:96T/48T
C12E8 10%溶液 C12E8 質(zhì)量規格:BR 小鼠尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 ,英文名: ALB ELISA Kit
氟化鈣(>98%,BR) Calcium floride 質(zhì)量規格:>98%,BR 小鼠信號轉導分子7(Smad7)ELISA檢測試劑盒MouseSmad7ELISAKit 96T/48T
硬脂酸鈣 Calcium stearate 質(zhì)量規格:BR 人泛素蛋白(Ub)試劑盒 Human ubiquitin,Ub ELISA Kit
香柏油 Cedar wood oil 質(zhì)量規格:商品級 Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISAKit大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規格:96T/48T
硫酸鈰八水(>97%,BR) Cerium(III) sulfate, octahydrate 質(zhì)量規格:>97%,BR DAPI復染試劑盒50
Pentachlorothiophenol,certified 標準品 Octrizole 133-49-3 純品型,100MG 特征形態(tài) 固態(tài)
五氯苯 標準品 Thiabendazole 608-93-5 純品型,0.5g 特征形態(tài) 固態(tài)
Pentabromophenol,certified 標準品 Oxcarbazepine 608-71-9 純品型,0.1G 特征形態(tài) 固態(tài)
上海Anti-UCN2/Urotensin II抗體價(jià)格1-(2-Amino-5-chlorophenyl)-1-(trifluoromethyl)-3-cyclopropyl-2-propyn-1-ol 中文名: 分子式:C13H11ClF3NO 度:98.0% 小鼠膽囊收縮素elisa試劑盒 小鼠膽囊收縮素試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠膽囊收縮素試劑盒,規格型號:96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠膽囊收縮素試劑盒、小鼠膽囊收縮素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Dulo
應用于IHC、WB、 IF、IP、ELISA等實(shí)驗,質(zhì)量保證,無(wú)效免費退換,另外本公司長(cháng)期供應化抗體、WB抗體、化試劑盒和抗體試驗所需全部相關(guān)試劑、熒光標記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗抗體。