抗體的鑒定:產(chǎn)品僅用于科研
1)抗體的效價(jià)鑒定:不管是用于診斷還是用于制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴散試驗來(lái)鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來(lái)表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線(xiàn),計算各自的結合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
人肝細胞生長(cháng)因子(HGF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱(chēng):F-TCF, HGFB, HPTA, SF, Scatter Factor, Hepapoietin A Human HGF(Hepatocyte Growth Factor) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組HGF濃度
產(chǎn)品名稱(chēng)
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規格
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貨號
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Anti-TACR3西格抗體
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0.2ml/200μg
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XG-01K87396
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英文名稱(chēng) Anti-TACR3
中文名稱(chēng) 速激肽受體3抗體
濃 度 1mg/1ml
規 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Guinea Pig
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 52kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human TACR3
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 MGC148060; MGC148061; Neurokinin B receptor; Neuromedin K Receptor; Neuromedin-K receptor; NK 3 receptor; NK-3 receptor; NK-3R; NK3 receptor; NK3R; NK3R_HUMAN; NK 3R; NK3 receptor; NK3R; NKR; TAC 3R; TAC3R; TAC3RL; Tachykinin receptor 3; TACR 3; TACR3.
稀釋方法:
方法1. 實(shí)驗前,將凍干粉抗體用無(wú)菌蒸餾水稀釋?zhuān)ɑ?/span>PBS稀釋?zhuān)?,將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復凍溶。
方法2. 實(shí)驗前,也可將凍干粉抗體用無(wú)菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 預試驗可做幾個(gè)梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個(gè)好的稀釋比例,再正式做,工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
石蠟切片和冰凍切片的比較
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是今天我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時(shí)要高溫烤片,可能會(huì )破壞組織的抗原 性,如果組織的抗原性較穩定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。
(2)冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能夠較好的保存組織的抗原活性,做化 時(shí)不需抗原修復這一步。缺點(diǎn)是細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構,可能會(huì )使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒(méi)石蠟的漂亮。當你買(mǎi)一抗時(shí),目錄上都寫(xiě)著(zhù)做什么樣的切片,如果它寫(xiě)著(zhù)只能做冰凍,就不能做石蠟,如寫(xiě)著(zhù)兩者都可,那就都能做。
(3)石蠟切片的優(yōu)點(diǎn)可以保持組織細胞的形態(tài)結構,且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,一定要存在-80度的低溫冰箱中,尤其是用來(lái)做原位雜交 的的切片,為了防止RNA降解,保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,容易成功,而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。
實(shí)驗要點(diǎn):
1.產(chǎn)品名稱(chēng)如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì )抑制標記反應。因此,蛋白質(zhì)在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì )有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個(gè)不同的分子比來(lái)篩選適條件;
3.用NHSB量過(guò)量也是不利的,抗原的結合位點(diǎn)可能因此被封閉,導致抗體失活;
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;
5.當游離ε-氨基(賴(lài)氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會(huì )降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性;
6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結合;
7.交聯(lián)反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會(huì )對生物素化抗體與親和素的結合產(chǎn)生競爭作用;
8.在細胞的熒光標記實(shí)驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。
腐植酸,腐殖酸 Humic acid 質(zhì)量規格:>90%,BR Rat8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISAKit大鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
光萼野百合堿(標準品) Usaramine 質(zhì)量規格:HPLC≥98%,標準品 載玻片細胞PAR-1蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20
L-天門(mén)冬氨酸鈉鹽 L-Aspartic acid salt 質(zhì)量規格:>99%,BR MonkeyHyaluronicacid,HAELISA試劑盒猴透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
花旗松素,二氫槲皮素 Taxifolin 質(zhì)量規格:>98% 小鼠壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒 ,英文名: TNFsR-Ⅱ ELISA Kit
花旗松素,二氫槲皮素(標準品) Taxifolin 質(zhì)量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠細胞色素C(Cyt-C)ELISA檢測試劑盒MouseCytochrome-C,Cyt-CELISAKit 96T/48T
蘆薈大黃素 Aloeemodin 質(zhì)量規格:>96%,BR 人抗IgA抗體(ai-IgA-Ab)試劑盒 Human ai-IgA aibody ELISA Kit
蘆薈大黃素(標準品) Aloeemodin 質(zhì)量規格:HPLC≥98%,標準品 Rat8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISAKit大鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
細胞色素C(馬源) Cytochrome C 質(zhì)量規格:>95%,BR,來(lái)源馬心 載玻片細胞PAR-2蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20
細胞色素C(牛源) Cytochrome C 質(zhì)量規格:>95%,BR,來(lái)源牛心 MonkeyInsulin,INSELISA試劑盒猴胰島素(INS)ELISA試劑盒規格:96T/48T
細胞色素C(豬源) Cytochrome C 質(zhì)量規格:>95%,BR,來(lái)源豬心 小鼠壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒 ,英文名: TNFsR-Ⅰ ELISA Kit
Aroclor 1248標準品 PCBNo.123 - 純品型,50mg 特征形態(tài) 固態(tài)
Aroclor 1242標準品 PCBNo.126 - 純品型,50mg 特征形態(tài) 固態(tài)
芳氯1221 標準品 2-Phenyl-2-oxoaceticacidethylester 11104-28-2 純品型,50mg 特征形態(tài) 固態(tài)
Anti-TACR3西格抗體Benzoyl-DL-mine 4703-38-2 中文名:苯甲?;?/span>-DL-蛋氨酸 分子式:C12H15NO3S 二氫二醇脫氫酶 英文名稱(chēng): Human Dihydrodiol Dehydrogenas 2 規格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): DDH2
Bindone 1707-95-5 中文名:雙茚二酮 分子式:C18H10O3 多巴胺 英文名稱(chēng): Human Dopamine 規格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): DPN
Benzy
應用于IHC、WB、 IF、IP、ELISA等實(shí)驗,質(zhì)量保證,無(wú)效免費退換,另外本公司長(cháng)期供應化抗體、WB抗體、化試劑盒和抗體試驗所需全部相關(guān)試劑、熒光標記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗抗體。