Matrigel 基底膜基質(zhì),無(wú)酚紅,Matrigel基質(zhì)會(huì )有色差變化(淡黃色到深紅色),是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,但是與5%CO2平衡后色差即會(huì )減少。凍融后,輕輕搖晃試劑瓶使Matrigel分散均勻。所有操作均需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行,試劑瓶瓶蓋可用70%乙醇擦拭,并自然干燥。應使用預冷的移液器以保證Matrigel呈勻漿狀。
推薦包被與成膠方法:
注意:為了保證Matrigel基質(zhì)膜的成膠性能與穩定性,稀釋濃度不應低于1:3,可用無(wú)血清培養基稀釋?zhuān)琈atrigel成膠后立即使用。
薄膠成膠方法:
1.凍融后,用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質(zhì)成勻漿狀。
2.將需要使用的培養板置于冰上,加入濃度為50μL/cm2生長(cháng)面積的Matrigel基質(zhì)。
3.在37℃放置30分鐘,即可使用。
厚膠成膠方法:
1.凍融后,用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質(zhì)成勻漿狀。
2.將需要使用的培養板置于冰浴,將培養的細胞與Matrigel基質(zhì)混合,用移液槍頭使其懸浮于基質(zhì)中。加入濃度為150-200μL/cm2生長(cháng)面積的Matrigel基質(zhì)。
3.在37℃放置30分鐘,可成膠??梢约尤爰毎囵B的基質(zhì),也可使細胞直接生長(cháng)在膠表面。
薄層包被方法:
1.凍融后,用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質(zhì)成勻漿狀。
2.根據使用需要,采用無(wú)血清培養基稀釋Matrigel基質(zhì)。根據實(shí)驗需要確定*佳包被濃度。
3.將稀釋的Matrigel基質(zhì)包被于所需的培養器皿中,包被量至少覆蓋整個(gè)器皿的生長(cháng)表面。室溫下孵育1小時(shí)。
4.去除未結合的Matrigel,用無(wú)血清培養基輕輕地沖洗。
兔血漿 茶黃素 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1IgG
霉菌培養基 茶黃素-3-沒(méi)食子酸 腺苷單磷酸活化蛋白激酶β2IgG
孟加拉紅培養基虎紅培養基 茶黃素-3'-沒(méi)食子 磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶γ1IgG
馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養基不含氯霉素 茶黃素-3,3'-雙沒(méi) 磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶γ1IgG
乳糖蛋白胨培養液 朝藿定A1 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1IgG
品紅亞硫酸鈉培養基 次黃嘌呤 兔抗人、大、小鼠磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1IgG
營(yíng)養瓊脂NA 草質(zhì)素苷 兔抗人、大、小鼠磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1IgG
營(yíng)養瓊脂平板NA 常春藤苷C 腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1IgG