實(shí)驗要點(diǎn)：
1.產(chǎn)品名稱(chēng)如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì )抑制標記反應。因此,蛋白質(zhì)在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì )有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個(gè)不同的分子比來(lái)篩選適條件；
3.用NHSB量過(guò)量也是不利的,抗原的結合位點(diǎn)可能因此被封閉,導致抗體失活；
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；
5.當游離ε-氨基(賴(lài)氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會(huì )降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性；
6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結合；
7.交聯(lián)反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會(huì )對生物素化抗體與親和素的結合產(chǎn)生競爭作用；
8.在細胞的熒光標記實(shí)驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。
應用于IHC、WB、 IF、IP、ELISA等實(shí)驗，質(zhì)量保證，無(wú)效免費退換，另外本公司長(cháng)期供應化抗體、WB抗體、化試劑盒和抗體試驗所需全部相關(guān)試劑、熒光標記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗抗體。
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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規格
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貨號
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Anti-Nm23/NME1/NME2抗體
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0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
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XG-01K85513
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英文名稱(chēng) Anti-Nm23/NME1/NME2
中文名稱(chēng) 腫瘤轉移抑制基因抗體
濃 度 1mg/1ml
規 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤
蛋白分子量 predicted molecular weight: 17kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Nm23
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 nucleoside dIPhosphatase kinase A; AWD; AWD, drosophila, homolog of; GAAD; Granzyme A activated DNase; GZMA activated DNase; Metastasis inhibition factor nm23; NB; NBS; NDK A; NDP kinase A; KDKA; NDPK-A; NDPKA; NDPKB; NM23; NM23 H1; NM23 long variant, included; NM23-H1; NM23-M1; NM23B; NM23H1B; NM23H1B, included; NME1; NME1-NME2 spliced read-through transcript, included; NME2; Non metastatic cells 1 protein; Non-metastatic cells 1, protein (NM23A) expressed in; Nonmetastatic cells 1, protein expressed in; Nonmetastatic protein 23; Nonmetastatic protein 23, homolog 1; Nucleoside diphosphate kinase A; Tumor metastatic process associated protein; Tumor metastatic process-associated protein.
稀釋方法：
方法1. 實(shí)驗前，將凍干粉抗體用無(wú)菌蒸餾水稀釋?zhuān)ɑ?/span>PBS稀釋?zhuān)?，將稀釋后的抗體分裝5-10支（20ulx5支或10ulx10支），放入-20℃保存，用一支拿一支，避免反復凍溶。
方法2. 實(shí)驗前,也可將凍干粉抗體用無(wú)菌蒸餾水稀釋50ul（或PBS稀釋50ul）成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存，用多少吸多少。
方法3. 預試驗可做幾個(gè)梯度1：100、200、400背景高還可做上去，選一個(gè)好的稀釋比例，再正式做，工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
石蠟切片和冰凍切片的比較
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片，這是今天我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時(shí)要高溫烤片，可能會(huì )破壞組織的抗原 性，如果組織的抗原性較穩定，則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的，可作冰凍切片。
(2)冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能夠較好的保存組織的抗原活性，做化 時(shí)不需抗原修復這一步。缺點(diǎn)是細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構，可能會(huì )使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚，做的片子沒(méi)石蠟的漂亮。當你買(mǎi)一抗時(shí)，目錄上都寫(xiě)著(zhù)做什么樣的切片，如果它寫(xiě)著(zhù)只能做冰凍，就不能做石蠟，如寫(xiě)著(zhù)兩者都可，那就都能做。
(3)石蠟切片的優(yōu)點(diǎn)可以保持組織細胞的形態(tài)結構，且容易存放在室溫，而冰凍切片比較麻煩，一定要存在-80度的低溫冰箱中，尤其是用來(lái)做原位雜交 的的切片，為了防止RNA降解，保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右，所以原位雜交探針容易滲透到組織中去，容易成功，而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。
抗體的鑒定：產(chǎn)品僅用于科研
1）抗體的效價(jià)鑒定：不管是用于診斷還是用于制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴散試驗來(lái)鑒定。
2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力?？贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來(lái)表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線(xiàn),計算各自的結合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3）抗體親和力：是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示,K的單位是L/mol?？贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
ECO105I (SNABI) 3,000U (10U/ul) 限制性?xún)惹忻负涂寺∶?/span>
ECO130I (STYI) 2,500U (10U/ul) 限制性?xún)惹忻负涂寺∶?/span>
ECO147I (STUI) 1,000U (10U/ul) 限制性?xún)惹忻负涂寺∶?/span>
ECO147I (STUI) 5,000U (10U/ul) 限制性?xún)惹忻负涂寺∶?/span>
SCAI 1,000U (10U/ul) 限制性?xún)惹忻负涂寺∶?/span>
Hederacolchiside A HPLC≥98% 5mg 小鼠血小板衍生生長(cháng)因子A(PDGFA)ELISA試劑盒 ，英文名： PDGFA ELISA Kit
Hederacolchiside E HPLC≥98% 5mg 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA檢測試劑盒rabbitmaixmetalloproteinase4,MMP-4ELISAKit 96T/48T
hederagenin OαLrhamnopyranosyl(→)(βDglucopyranosyl(→))αLarabinopyranoside HPLC≥98% 5mg 犬白介素4(IL-4)試劑盒 Dog ierleukin 4,IL-4 ELISA Kit
Karenitecin HPLC≥98% 20mg 英文名稱(chēng)HumanAquaporin5ELISAKit人水通道蛋白5(AQP5)規格：96T/48T
L羥基異亮氨酸 HPLC≥98% 20mg 大鼠PDGFβ基因甲基化檢測試劑盒20
Larotaxel HPLC≥98% 20mg RatleukoieneE4,LT-E4ELISA試劑盒大鼠白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒規格：96T/48T
Lup()enoic acid, [βDglucopyranosyl(→)[aLrhamnopyranosyl) (→)a Larabinopyranosyl]oxy], (β,a)) HPLC≥98% 5mg 小鼠血小板生長(cháng)因子(PDGF)ELISA試劑盒 ，英文名： PDGF ELISA Kit
小鼠內脂素/內臟脂肪素(visfatin)ELISA檢測試劑盒MousevisfatinELISAKit 96T/48T
L半胱氨酸 HPLC≥98% 200mg 人基質(zhì)細胞衍生因子1a(SDF1A)試劑盒 Human somal cell-derived factor 1 alpha,SDF1A ELISA kit
L苯丙氨酸 HPLC≥98% 200mg RatCalretinin,CRELISAKit大鼠鈣結合蛋白(CR)ELISA試劑盒規格：96T/48T
磺菌威 標準品 Palmitoleicacid 66952-49-6 純品型，25mg 特征形態(tài) 固態(tài)
鹽酸美沙吡林 標準品 Palmiticacid-n-butylester 135-23-9 純品型，0.1G 特征形態(tài) 固態(tài)
甲醇 標準品 Methanol 67-56-1 純品型，1ml 特征形態(tài) 固態(tài)
Anti-Nm23/NME1/NME2抗體細胞CASPASE-4蛋白表達比色法定量檢測試劑盒 10/50 次
細胞CASPASE-4蛋白表達熒光定量檢測試劑盒 10/50 次
CASPASE-4蛋白表達西方雜交分析試劑盒 5次
CASPASE-4蛋白共沉淀分析試劑盒 5次
CASPASE-4蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒 25次