實(shí)驗要點(diǎn)：
1.產(chǎn)品名稱(chēng)如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì )抑制標記反應。因此,蛋白質(zhì)在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì )有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個(gè)不同的分子比來(lái)篩選適條件；
3.用NHSB量過(guò)量也是不利的,抗原的結合位點(diǎn)可能因此被封閉,導致抗體失活；
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；
5.當游離ε-氨基(賴(lài)氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會(huì )降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性；
6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結合；
7.交聯(lián)反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會(huì )對生物素化抗體與親和素的結合產(chǎn)生競爭作用；
8.在細胞的熒光標記實(shí)驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。
應用于IHC、WB、 IF、IP、ELISA等實(shí)驗，質(zhì)量保證，無(wú)效免費退換，另外本公司長(cháng)期供應化抗體、WB抗體、化試劑盒和抗體試驗所需全部相關(guān)試劑、熒光標記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗抗體。
|
產(chǎn)品名稱(chēng)
|
規格
|
貨號
|
|
Anti-NGN1/Neurogenin 1抗體
|
0.2ml/200μg
|
XG-01K85440
|
英文名稱(chēng) Anti-NGN1/Neurogenin 1
中文名稱(chēng) 神經(jīng)元素1抗體
濃 度 1mg/1ml
規 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
研究領(lǐng)域 細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 干細胞 細胞類(lèi)型標志物 表觀(guān)遺傳學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 26kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human NGN1/Neurogenin 1
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200
別 名 AKA; Ath4c; bHLHa6; Class A basic helix-loop-helix protein 6; Helix loop helix protein mATH 4C; MATH4C; NeuroD3; Neurog 1; Neurog1; Neurogenic basic helix loop helix protein; Neurogenic basic-helix-loop-helix protein; Neurogenic differentiation 3; Neurogenic differentiation factor 3; Neurogenin-1; Neurogenin1; Ngn; NGN-1; Ngn1; NGN1_HUMAN.
稀釋方法：
方法1. 實(shí)驗前，將凍干粉抗體用無(wú)菌蒸餾水稀釋?zhuān)ɑ?/span>PBS稀釋?zhuān)?，將稀釋后的抗體分裝5-10支（20ulx5支或10ulx10支），放入-20℃保存，用一支拿一支，避免反復凍溶。
方法2. 實(shí)驗前,也可將凍干粉抗體用無(wú)菌蒸餾水稀釋50ul（或PBS稀釋50ul）成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存，用多少吸多少。
方法3. 預試驗可做幾個(gè)梯度1：100、200、400背景高還可做上去，選一個(gè)好的稀釋比例，再正式做，工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
石蠟切片和冰凍切片的比較
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片，這是今天我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時(shí)要高溫烤片，可能會(huì )破壞組織的抗原 性，如果組織的抗原性較穩定，則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的，可作冰凍切片。
(2)冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能夠較好的保存組織的抗原活性，做化 時(shí)不需抗原修復這一步。缺點(diǎn)是細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構，可能會(huì )使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚，做的片子沒(méi)石蠟的漂亮。當你買(mǎi)一抗時(shí)，目錄上都寫(xiě)著(zhù)做什么樣的切片，如果它寫(xiě)著(zhù)只能做冰凍，就不能做石蠟，如寫(xiě)著(zhù)兩者都可，那就都能做。
(3)石蠟切片的優(yōu)點(diǎn)可以保持組織細胞的形態(tài)結構，且容易存放在室溫，而冰凍切片比較麻煩，一定要存在-80度的低溫冰箱中，尤其是用來(lái)做原位雜交 的的切片，為了防止RNA降解，保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右，所以原位雜交探針容易滲透到組織中去，容易成功，而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。
抗體的鑒定：產(chǎn)品僅用于科研
1）抗體的效價(jià)鑒定：不管是用于診斷還是用于制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴散試驗來(lái)鑒定。
2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力?？贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來(lái)表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線(xiàn),計算各自的結合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3）抗體親和力：是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示,K的單位是L/mol?？贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
Deltorphin II Moth Cytochrome C (MCC)Fragment He-LWamide II, LWamideII C-Reactive Protein (CRP)(201-206) For-Val-Val-OH
Deltorphin I Ac-HHGH-NHMe Cyanea-RFamide I C-Reactive Protein (CRP) (174-185) For-Phe-Met-OH
Deltorphin HL Calcium-Like Peptide 3,CALP-3 C-Reactive Protein (CRP)(77-82) For-Nle-LF-Nle-YK-OH
(β -Asp5)-Delta-Sleep Inducing Peptide HGG Calcium-Like Peptide,CALP-1 Tyr-Proinsulin C-Peptide(55-89) (human) For-Nle-LF-OH
Delta-Sleep Inducing Peptide, DSIP GH Fluorogenic Human CMVProtease Substrate Proinsulin C-Peptide(31-63) (porcine) For-MV-OH
ObetaD吡喃阿洛糖甙,,貝殼杉烷三醇 HPLC≥98% 5mg 蛋白樣品賴(lài)氨酸層析法去內試劑盒20
O甲基異甘草苷元 HPLC≥98% 5mg Ratmyeloperoxidase,MPOELISA試劑盒大鼠髓過(guò)氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒規格：96T/48T
鄰乙?；u基馬桑 HPLC≥98% 5mg 小鼠腺苷高半胱酸酶(AHCY)ELISA試劑盒 ，英文名： AHCY ELISA Kit
,二羥基山芝烯酮 HPLC≥98% 5mg 小鼠褪黑素(MT)ELISA檢測試劑盒MouseMelatonin,MTELISAKit 96T/48T
,二羥基()流明酸甲酯 HPLC≥98% 5mg 人紅細胞**素受體(EPOR)試劑盒 Human Erythropoietin receptor,EPOR ELISA Kit
,'','',,'',,六甲氧基黃酮 HPLC≥98% 5mg RatC-telopeptideoftypeⅠcollagen,CTX-ⅠELISAKit大鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒規格：96T/48T
,',三羥基黃烷酮 HPLC≥98% 5mg 3%蛋白電泳聚集預制膠溶液500毫升
,O異亞丙基莽草酸 HPLC≥98% 5mg MousecyclophilinA,CyPAELISA試劑盒小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)ELISA試劑盒規格：96T/48T
,鄰二乙?；倘~松素 HPLC≥98% 5mg 小鼠腺苷A2b受體(ADORA2b)ELISA試劑盒 ，英文名： ADORA2b ELISA Kit
ObetaD葡糖苷雞納酸酯 HPLC≥98% 5mg 兔交聯(lián)物(PY)ELISA檢測試劑盒Rabbitpyridiniumcrosslink/PyriLinks,PYELISAKit 96T/48T
分散黃9/CI＃10375 標準品 Heptachlor-exo-epoxide(cis-,isomerB) 10ug/ml于乙腈，10mL 特征形態(tài) 液態(tài)
Diquat dibromide hydrate,10ng/ul 標準品 Heptachlor 10ng/ul于水,10ml 特征形態(tài) 液態(tài)
二正丙基二氯錫 標準品 Phthalicacid,bis-hexylesterD4 10ng/ul，10ML 特征形態(tài) 液態(tài)
Anti-NGN1/Neurogenin 1抗體體液銅離子濃度熒光定量檢測試劑盒 20次
食物銅離子濃度熒光定量檢測試劑盒 20次
環(huán)境銅離子濃度熒光定量檢測試劑盒 20次
石蠟切片羅丹寧（RHODANINE）銅染色試劑盒 50次
石蠟切片紅氨酸（RUBEANIC ACID）銅染色試劑盒 50次