實(shí)驗要點(diǎn)：
1.產(chǎn)品名稱(chēng)如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì )抑制標記反應。因此,蛋白質(zhì)在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì )有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個(gè)不同的分子比來(lái)篩選適條件；
3.用NHSB量過(guò)量也是不利的,抗原的結合位點(diǎn)可能因此被封閉,導致抗體失活；
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；
5.當游離ε-氨基(賴(lài)氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會(huì )降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性；
6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結合；
7.交聯(lián)反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會(huì )對生物素化抗體與親和素的結合產(chǎn)生競爭作用；
8.在細胞的熒光標記實(shí)驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。
應用于IHC、WB、 IF、IP、ELISA等實(shí)驗，質(zhì)量保證，無(wú)效免費退換，另外本公司長(cháng)期供應化抗體、WB抗體、化試劑盒和抗體試驗所需全部相關(guān)試劑、熒光標記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗抗體。
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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規格
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貨號
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Anti-NOX2/gp91phox抗體
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0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
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XG-01K85265
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英文名稱(chēng) Anti-NOX2/gp91phox
中文名稱(chēng) NADPH氧化酶2抗體
濃 度 1mg/1ml
規 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 63kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human NOX2
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 CGD91-phox; CYBB; Cytochrome b(558) beta chain; Cytochrome b-245 heavy chain; gp91-1; gp91-phox; Heme-binding membrane glycoprotein gp91phox; NADPH oxidase 2; Neutrophil cytochrome b 91 kDa polypeptide; NOX2; p22 phagocyte B-cytochrome; Superoxide-generating NADPH oxidase heavy chain subunit.
稀釋方法：
方法1. 實(shí)驗前，將凍干粉抗體用無(wú)菌蒸餾水稀釋?zhuān)ɑ?/span>PBS稀釋?zhuān)?，將稀釋后的抗體分裝5-10支（20ulx5支或10ulx10支），放入-20℃保存，用一支拿一支，避免反復凍溶。
方法2. 實(shí)驗前,也可將凍干粉抗體用無(wú)菌蒸餾水稀釋50ul（或PBS稀釋50ul）成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存，用多少吸多少。
方法3. 預試驗可做幾個(gè)梯度1：100、200、400背景高還可做上去，選一個(gè)好的稀釋比例，再正式做，工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
石蠟切片和冰凍切片的比較
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片，這是今天我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時(shí)要高溫烤片，可能會(huì )破壞組織的抗原 性，如果組織的抗原性較穩定，則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的，可作冰凍切片。
(2)冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能夠較好的保存組織的抗原活性，做化 時(shí)不需抗原修復這一步。缺點(diǎn)是細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構，可能會(huì )使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚，做的片子沒(méi)石蠟的漂亮。當你買(mǎi)一抗時(shí)，目錄上都寫(xiě)著(zhù)做什么樣的切片，如果它寫(xiě)著(zhù)只能做冰凍，就不能做石蠟，如寫(xiě)著(zhù)兩者都可，那就都能做。
(3)石蠟切片的優(yōu)點(diǎn)可以保持組織細胞的形態(tài)結構，且容易存放在室溫，而冰凍切片比較麻煩，一定要存在-80度的低溫冰箱中，尤其是用來(lái)做原位雜交 的的切片，為了防止RNA降解，保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右，所以原位雜交探針容易滲透到組織中去，容易成功，而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。
抗體的鑒定：產(chǎn)品僅用于科研
1）抗體的效價(jià)鑒定：不管是用于診斷還是用于制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴散試驗來(lái)鑒定。
2）抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力?？贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來(lái)表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線(xiàn),計算各自的結合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3）抗體親和力：是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示,K的單位是L/mol?？贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
ADAMTS7 peptide 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗原 0.5mg
Gastrin Releasing Peptide 英文名稱(chēng)： 促胃泌素釋放肽抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Batroxobin Protein 蛇毒巴曲酶抗體 規格 0.2ml
Anti-HBA1/FITC 熒光素標記人類(lèi)血紅蛋白α1抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-rat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗大鼠IgG 規格 0.1ml
Anti-PD-1/FITC 熒光素標記程序性死亡1抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
12種酚類(lèi)混標（HJ 638-2012） PCBNo.42 - 1000ug/mL于甲醇，1mL 特征形態(tài) 固態(tài)
8種氯苯和26種有機氯農藥混標 (HJ 699-2014) PCBNo.19 - 100ug/mL于95%己烷:%丙酮，1mL 特征形態(tài) 固態(tài)
21種酚類(lèi)混標（HJ 703-2014/HJ 711-2014） Phenolmix - 1000ug/mL于異丙醇，1mL 特征形態(tài) 固態(tài)
Goat Anti-rabbit IgG/Gold 膠體金標記的羊抗兔IgG 0.5ml
Factor XII light chain 英文名稱(chēng)： 凝血因子12輕鏈抗體 0.2ml
FasL抗體 Anti-FasLAnti-FasL 0.1ml
Anti-PHD3 /FITC 熒光素標記脯氨酸羥化酶抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Syndecan 4(Ser179) 0酸化多配體聚糖4(Ser179)抗體 規格
Anti-NOX2/gp91phox抗體（10樣本）
線(xiàn)粒體呼吸鏈復合物II（琥珀酸－輔酶Q還原酶） 20次
活性定量檢測試劑盒
線(xiàn)粒體呼吸鏈復合物III（輔酶Q－細胞色素C還原酶） 20次
活性定量檢測試劑盒 （10樣本）