通用規則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(cháng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開(kāi)酶標儀,使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時(shí),避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì )自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機時(shí),倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。
產(chǎn)品名稱(chēng)
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異檸檬酸裂解酶檢測試劑盒
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規格
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盒
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貨號
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XG-0113369
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樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (通過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 通過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩定,使用前需自行測定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準備樣品:
a,細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內,顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay
buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測。
d,血液中的紅細胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續 計算單位蛋白重量組織或細胞內的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設置空白管、自身對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進(jìn)行測定。樣品的檢測能設置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒(méi)有分光光度計,亦可用酶標儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調零,讀取各管吸光度值。一般應數小時(shí)內檢測完畢。
小鼠海馬趾神經(jīng)元MN-h光萼野百合堿(標準品)質(zhì)量規格:HPLC≥98%,標準品Usaramine
CGA Others Human FSH
alpha / TSH alpha / CGA 細胞裂解液 (陽(yáng)性對照) L-天門(mén)冬氨酸鈉鹽質(zhì)量規格:>99%,BRL-Aspartic
acid salt
永生化表皮細胞;HaCaT花旗素,二氫槲皮素質(zhì)量規格:>98%Taxifolin
大鼠肝細胞;BRL 3A 膽管細胞型肝癌細胞,HCCC-9810細胞 C26細胞,小鼠結腸癌花旗素,二氫槲皮素(標準品)質(zhì)量規格:HPLC≥98%,標準品Taxifolin
6-10B, 鼻咽癌細胞系 Human氟他胺-d7質(zhì)量規格:美國進(jìn)口Flutamide-d7
豬腎細胞;PK(15)CytochalasinB胞菌素B1公斤BR,600u/mg,豬胰
大鼠肺細胞;WL1 胃腺癌細胞,SGC-7901細胞 GR細胞,鼠成纖維細胞系#NAME
2-inoneolinqccrboxcldqhydq 2470-96-
Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞 MouseCinnamonoil桂油25克CP
PCSK1 Others Human
PCSK1 / NEC1 細胞裂解液 (陽(yáng)性對照) 質(zhì)粒提取試劑盒10片/箱
腸平滑肌細胞cDNAHISMC cDNA(D-核糖)
羊源性恒溫核酸檢測試劑盒24T/48TNicorandil651416尼可地爾
鴨源性恒溫核酸檢測試劑盒24T/48TNicarbazin35尼卡巴嗪
豬源性恒溫核酸檢測試劑盒24T/48TNevirapine12961奈偉拉平
NOS基因恒溫核酸檢測試劑盒24T/48TNeutral berberine sulfate3161硫酸黃連素
CaMV35S基因恒溫核酸檢測試劑盒24T/48TNeritaloside4653
人凝血酶/抗凝血酶復合物(TAT)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱(chēng):TAT Human
TAT(Thrombin/Antithrombin Complex) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組TAT濃度
人髓分化因子88(MyD88)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱(chēng):MYD88D Human
MyD88(Myeloid Differentiation Factor 88) 異檸檬酸裂解酶檢測試劑盒ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組MyD88濃度
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