通用規則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(cháng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開(kāi)酶標儀,使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時(shí),避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì )自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機時(shí),倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。
產(chǎn)品名稱(chēng)
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硝酸還原酶檢測試劑盒
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規格
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盒
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貨號
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XG-0113359
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樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (通過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 通過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩定,使用前需自行測定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準備樣品:
a,細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內,顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay
buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測。
d,血液中的紅細胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續 計算單位蛋白重量組織或細胞內的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設置空白管、自身對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進(jìn)行測定。樣品的檢測能設置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒(méi)有分光光度計,亦可用酶標儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調零,讀取各管吸光度值。一般應數小時(shí)內檢測完畢。
小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細胞完全培養基 100mL利多卡因(標準品)質(zhì)量規格:含量測定
C3H/10T1/2, Clone 8小鼠胚胎成纖維細胞 C3H/10T1/2, Clone 8 mouse
embryonic fibroblast MEM培養基(GIBCO)+10%FBS鹽酸利多卡因質(zhì)量規格:>99%,AR HCl
IL1B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL-1 beta / IL1B 蛋白鹽酸利多卡因(標準品)質(zhì)量規格:含量測定 HCl
NCI-H520(肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 T/G HA-VSMC(主動(dòng)脈血管平滑肌細胞)L-胱氨酸鹽酸鹽質(zhì)量規格:>98%,BRL-Cystine
CL-0342H4-II-E-C3(大鼠肝癌細胞 )5×106cells/瓶×2L-半胱氨酸質(zhì)量規格:含量98~101%,BRL-Cysteine
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B6 II型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL9-芴酮(>98.0%(GC))質(zhì)量規格:>98.0%(GC)9-Fluorenone
Caco-2,結直腸腺癌細胞 Human9-芴醇(>95.0%(GC))質(zhì)量規格:>95.0%(GC)9-Fluorenol
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素 (Hemagglutinin /
HA) 細胞裂解液 (陽(yáng)性對照) 2-芴(>95.0%(T))質(zhì)量規格:>95.0%(T)2-Fluorenecarboxaldehyde
小腦顆粒細胞總RNAHCGC NA2-羥基-9-芴酮(>90.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規格:>90.0%(HPLC)(T)2-Hydroxy-9-fluorenone
PARP3 Others Human
PARP-3 / PARP3 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細胞裂解液 (陽(yáng)性對照) 2,6-二溴蒽醌(>95.0%(HPLC))質(zhì)量規格:>95.0%(HPLC)2,6-Dibromoanthraquinone
新布尼亞病毒單重熒光PCR檢測試劑盒48Nicorandil651416尼可地爾
麻疹病毒/風(fēng)疹病毒雙重熒光PCR檢測試劑盒48Dronedarone 1416253鹽酸決奈達隆
東部/西部/委內瑞拉馬腦炎病毒三重熒光PCR檢測試劑盒48Bisoprolol fumarate43443富馬酸比索洛爾
登革熱Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ/Ⅳ病毒四重熒光PCR檢測試劑盒484-[2-[(3-Ethyl-methyl-oxo-pyrrolin-yl)carboxamido]ethyl]benzenesulfonamide11189
小反芻獸疫病毒單重熒光PCR檢測試劑盒48Minoxidil3841米諾地爾
人生長(cháng)(GH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱(chēng):GH1, GH-N, GHN,
hGH-N, Somatotropin Human GH(Growth Hormone) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組GH濃度
人骨鈣素(OC/BGP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱(chēng):BGLAP, BGP, OC,
OCN, bone gamma-carboxyglutamate protein, Osteocalcin Human OC/BGP(Osteocalcin)
ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組OC/BGP濃度
硝酸還原酶檢測試劑盒【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,避免給您帶來(lái)不必要的損失,請仔細閱讀購買(mǎi)說(shuō)明!